Anti-BTLA (CD272) Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q7Z6A9

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: BTLA-Funktion und -Lokalisierung

• BTLA (B- und T-Lymphozyten-Attenuator), auch als CD272 oder BTLA1 bezeichnet, ist ein hemmender Rezeptor der Immunglobulin-Superfamilie, der auf Lymphozyten exprimiert wird.
• Er reguliert die Signalgebung des T-Zell- und B-Zell-Antigenrezeptors negativ durch Rekrutierung der Phosphatasen SHP-1 und SHP-2 und moduliert so die Schwellenwerte der Immunantwort.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:12796776
  PMID:14652006
  PMID:15568026
• BTLA bindet an seinen Liganden TNFRSF14 (HVEM) sowohl in cis (auf derselben Zelle) als auch in trans (zwischen Zellen). Cis-Interaktionen erhalten die Ruhe naiver T-Zellen, während Trans-Interaktionen das Überleben von Effektor-T-Zellen während adaptiver Reaktionen unterstützen.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:19915044
• Das Protein ist an der Zellmembran lokalisiert und enthält eine einzelne Transmembranhelix.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung und Phosphorylierung, und die extrazelluläre Domäne enthält eine Disulfidbrücke; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• Als Immun-Checkpoint-Molekül spielt BTLA eine kritische Rolle bei der Aufrechterhaltung der Immunhomöostase und -toleranz.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 31–241 und deckt die gesamte extrazelluläre Domäne ab. Dieses Design kann die Erkennung sowohl der glykosylierten als auch der unglykosylierten Rezeptorformen unter nativen und denaturierenden Bedingungen ermöglichen.
• Für den Western Blot validieren Sie den Antikörper mit Zelllinien, von denen bekannt ist, dass sie BTLA exprimieren (z. B. Jurkat oder Raji), und fügen geeignete negative Kontrollen hinzu (z. B. Knockdown- oder Knockout-Proben). Optimieren Sie die Proteinbeladung und die Antikörperkonzentration für eine klare Bandenerkennung nahe 33 kDa.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie das rekombinante Immunogen als positive Kontrolle verwenden; beachten Sie, dass die polyklonale Natur zu Chargenschwankungen beitragen kann, sodass die Leistung für jede neue Charge bestätigt werden sollte.
• Die Kreuzreaktivität des Antikörpers mit murinem BTLA erweitert seine Nützlichkeit auf Mausmodelle, aber eine unabhängige Überprüfung im Gewebe der entsprechenden Spezies ist ratsam.

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