Anti-BTK-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q06187

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: BTK-Funktion und Lokalisierung

• BTK (Bruton-Tyrosinkinase) ist eine nicht-Rezeptor-Tyrosinkinase, die für die Entwicklung, Differenzierung und Signalübertragung von B-Lymphozyten essentiell ist. Sie phosphoryliert PLCG2 in Zusammenarbeit mit BLNK nach Bindung des B-Zell-Antigenrezeptors (BCR) und initiiert so die nachgeschaltete Calcium-Mobilisierung und Proteinkinase C-Aktivierung. Verwandte Referenzen: PMID:11606584
• Fungiert als Signalplattform, die verschiedene Wege verbindet; beteiligt an der Zytokinrezeptor-Signalübertragung und den Toll-like-Rezeptor (TLR)-Wegen und spielt eine kritische Rolle in der angeborenen und adaptiven Immunität. Verwandte Referenzen: PMID:16517732 PMID:17932028
• Innerhalb des TLR-Weges reguliert BTK die TLR9-Aktivierung in Milz-B-Zellen und vermittelt die Tyrosin-Phosphorylierung von TIRAP, was zu dessen Abbau führt. Verwandte Referenzen: PMID:16415872 PMID:16517732 PMID:17932028
• Induziert NF-kappa-B-Aktivität über TLR8/9-Signalübertragung und reguliert die Transkription von Hunderten von Genen; phosphoryliert auch transient den Transkriptionsfaktor GTF2I, fördert dessen nukleäre Translokation und Modulation der Genexpression. Verwandte Referenzen: PMID:19290921 PMID:9012831
• Trägt zur Transkriptionsregulation über ARID3A und NFAT bei; erforderlich für die Bildung eines funktionellen ARID3A-DNA-Bindungskomplexes, obwohl keine direkte DNA-Bindung nachgewiesen wurde. Verwandte Referenzen: PMID:16738337
• Zeigt eine duale Rolle in der Apoptoseregulation und beteiligt sich an der STING1-vermittelten Typ-I-Interferon-Antwort durch Phosphorylierung von DDX41. Verwandte Referenzen: PMID:9751072 PMID:25704810
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Zytoplasma, Zellmembran, Zellkern und Membranrafts, was seine dynamischen Signalrollen widerspiegelt. Vorwiegend in B-Lymphozyten exprimiert.
• Proteineigenschaften umfassen SH2-, SH3- und PH-Domänen, eine Zinkfinger-Motiv und eine Kinasedomäne; posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung und Acetylierung regulieren seine Aktivität.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die N-terminalen PH- und TH-Domänen (aa 30-240), die die Membranzielsteuerung und Protein-Protein-Wechselwirkungen vermitteln. Dies könnte die Erkennung sowohl phosphorylierter als auch nicht-phosphorylierter BTK-Formen ermöglichen.
• Für Western Blot ist eine Bande bei etwa 76 kDa zu erwarten; validieren Sie die Expression unter Verwendung von B-Lymphozyten-Zelllinien (z.B. Ramos, Raji) und geeigneten Ladekontrollen.
• Bei IHC-P sollten Sie die hitzeinduzierte Epitop-Demaskierung in Betracht ziehen und das Färbemuster in B-Zell-reichem Gewebe wie Milz oder Lymphknoten bestätigen; Isotypenkontrollen werden empfohlen.
• Für ELISA titrieren Sie den Antikörper, um die optimale Beschichtungs- und Nachweiskonzentration zu bestimmen; Kreuzreaktivität mit murinem und ratten BTK kann multispazies-Studien erleichtern.
• Beachten Sie, dass BTK in Nicht-B-Zellen auf niedrigem Niveau exprimiert wird; die Einbeziehung geeigneter Probenkontrollen wird empfohlen, um falsch negative Ergebnisse zu vermeiden.

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