Anti-BTC Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P35070

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: BTC-Funktion und -Lokalisierung

• Probetacellulin (BTC) ist ein Mitglied der Epidermalen Wachstumsfaktor (EGF)-Familie, das als transmembraner Vorläufer synthetisiert wird, der proteolytisch gespalten wird, um den reifen Wachstumsfaktor freizusetzen.
• BTC fungiert als hochaffiner Ligand für EGFR, ERBB4 und andere Mitglieder der EGF-Rezeptorfamilie und wirkt als potenter Mitogen für retinale Pigmentepithelzellen und vaskuläre glatte Muskelzellen.
• Es enthält eine charakteristische EGF-ähnliche Domäne mit konservierten Disulfidbindungen, die für seine dreidimensionale Struktur und die Rezeptorbindung essentiell sind.
• Subzellulär ist BTC als Vorläufer an der Zellmembran lokalisiert und nach der Verarbeitung in den extrazellulären Raum sezerniert.
• BTC wird vorwiegend in der Bauchspeicheldrüse und im Dünndarm exprimiert, aber auch in verschiedenen anderen Geweben und Tumorzellen synthetisiert, was Rollen sowohl in der normalen Physiologie als auch im Krebs nahelegt.
• Zusätzliche Merkmale umfassen N-verknüpfte Glykosylierung und eine einzelne Transmembranhelix, was es als Typ-I-Membranprotein klassifiziert.
• Der Referenz-Proteomeintrag hebt seine Identifizierung durch massenspektrometrische Proteomik hervor und bestätigt die endogene Expression.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das zur Erzeugung dieses Antikörpers verwendete Immunogen entspricht der extrazellulären Domäne von menschlichem BTC (Aminosäuren 32–178), was das Signalpeptid (aa 1–31) ausschließt und die mutmaßliche reife Wachstumsfaktorregion einschließt. Daher wird erwartet, dass der Antikörper sowohl den vollständigen Vorläufer als auch das gespaltene reife Protein erkennt.
• Für den Western Blot (WB) wird unter reduzierenden Bedingungen eine Bande um 20 kDa detektiert, was mit dem vorhergesagten Molekulargewicht des BTC-Monomers übereinstimmt. Erwägen Sie die Verwendung von reduzierenden und nicht-reduzierenden Bedingungen, um disulfidverknüpfte Formen zu beobachten.
• BTC ist ein sezerniertes Protein; daher kann es in Zelllysaten in Membranfraktionen angereichert oder in konditioniertem Medium konzentriert sein. Für Gewebeproben werden Bauchspeicheldrüse und Dünndarm als positive Kontrollen empfohlen.
• In ELISA-Anwendungen kann dieser polyklonale Antikörper als Erfassungs- oder Detektionsreagenz dienen, aber optimale Arbeitskonzentrationen und Paarungen sollten in der relevanten Probenmatrix validiert werden.

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