Anti-BST2 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q10589

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: BST2-Funktion und -Lokalisierung

• BST2 (Knochenmarkstroma-Antigen 2), auch bekannt als Tetherin, CD317 oder HM1.24-Antigen, ist ein interferoninduzierter Wirts-Restriktionsfaktor mit zwei Hauptisoformen, die sich in ihrer antiviralen Aktivität und Empfindlichkeit gegenüber viralen Gegenmaßnahmen unterscheiden. Isoform 2 ist bemerkenswert resistent gegen HIV-1 Vpu-vermittelten Abbau.
  Verwandte Referenzen: PMID:23028328 PMID:26172439
• Der primäre antivirale Mechanismus beinhaltet die direkte physische Verankerung (Tethering) von neugebildeten umhüllten Virionen an die Zellmembran, wodurch ihre Freisetzung verhindert wird. Verankerte Virionen können durch Endozytose internalisiert und abgebaut werden, wodurch die zellfreie Virusausbreitung eingeschränkt wird.
  Verwandte Referenzen: PMID:18200009 PMID:18342597 PMID:19036818
• BST2 beschränkt ein breites Spektrum umhüllter Viren, einschließlich Retroviren (HIV-1, HIV-2, SIV), Filoviren (Ebola, Marburg), Flaviviren (HCV), Herpesviren (KSHV), Coronaviren (SARS-CoV) und viele andere.
  Verwandte Referenzen: PMID:18200009 PMID:18342597 PMID:19179289
• Darüber hinaus der viralen Restriktion kann BST2 die proteolytische Aktivität von MMP14 an der Zelloberfläche hemmen, was zu einer reduzierten MMP15-Aktivierung und einer Hemmung des Zellwachstums und der Zellmigration führt.
  Verwandte Referenzen: PMID:22065321
• In plasmazytoiden dendritischen Zellen stimuliert BST2 die LILRA4/ILT7-Signalgebung und stellt während einer Virusinfektion eine negative Rückkopplung für die IFN-Produktion dar.
  Verwandte Referenzen: PMID:19564354 PMID:26172439
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst den Golgi-Apparat (trans-Golgi-Netzwerk), die Zellmembran, Membran-Rafts, das Zytoplasma, die apikale Zellmembran und späte Endosomen, was mit ihrer Rolle beim viralen Trafficking und der Immunsignalgebung übereinstimmt.
• BST2 wird vorwiegend in Leber, Lunge, Herz und Plazenta exprimiert, mit niedrigeren Spiegeln in Bauchspeicheldrüse, Niere, Skelettmuskel und Gehirn. Auf Proteinebene ist es stark auf B-Zellen, T-Zellen, Monozyten, NK-Zellen und dendritischen Zellen exprimiert und in Zellen des multiplen Myeloms überexprimiert.
• Strukturell zeichnet sich BST2 durch eine Signalanker-Domäne, eine Single-Pass-Transmembrandomäne, eine Coiled-Coil-Ektodomäne, einen C-terminalen GPI-Anker und Disulfidbindungen aus, die für seine Verankerungsfunktion und Dimerisierung entscheidend sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 49–160 von menschlichem BST2 ab, einen Bereich innerhalb der N-terminalen Ektodomäne. Dieser Bereich ist wahrscheinlich gut an der Zelloberfläche exponiert, was den Antikörper für die Detektion von membrangebundenem BST2 in Anwendungen wie IF/ICC und IHC-P geeignet macht.
• Für Western Blots beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht von BST2 unter reduzierenden Bedingungen ca. 20 kDa; Glykosylierung und Dimerisierung können jedoch zu Species mit höherem Molekulargewicht führen. Eine Optimierung der reduzierenden Bedingungen und Ladekontrollen wird empfohlen.
• Bei der Immunhistochemie und Immunfluoreszenz sollte die BST2-Expression in positiven Kontrollgeweben wie Leber, Lunge oder multiplem Myelom überprüft werden. Membran- und intrazelluläre Färbungen sind zu erwarten, given its Golgi and endosomal localization.
• Dieser Antikörper ist nur für menschliche Proben validiert; eine Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht bestimmt. Für ELISA sollte die Paarung mit einem passenden Detektionsantikörper für eine empfindliche Antigen-Erfassung in Betracht gezogen werden.
• Da BST2 ein IFN-induzierbares Gen ist, kann die Behandlung von Zellen mit Interferon die Zielexpression hochregulieren und die Detektionsempfindlichkeit erhöhen.

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