Anti-BRG1/SMARCA4 monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P51532

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: BRG1/SMARCA4-Funktion und Lokalisierung

• BRG1/SMARCA4 (auch bekannt als BAF190A, SNF2-beta und Protein Brahma-Homolog 1) ist ein ATP-abhängiger Chromatin-Remodeler, der ein Kernelement des SWI/SNF-Komplexes ist und DNA-Nukleosom-Interaktionen verändert, um die Transkription zu regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:15075294 PMID:29374058 PMID:30339381
• Es fungiert sowohl als Transkriptionsaktivator als auch als -repressor mit entscheidenden Rollen in der Neuralentwicklung: Es ist Teil der npBAF- und nBAF-Komplexe, wobei der Untereinheitenwechsel (z.B. ACTL6A/B, PHF10/DPF) den Übergang von proliferierenden neuralen Vorläuferzellen zu postmitotischen Neuronen antreibt.
• BRG1/SMARCA4 vermittelt Notch-abhängige proliferative Signale in neuralen Stammzellen, während es die SHH-abhängige Differenzierung unterdrückt und so die Selbsterneuerung fördert.
• Im CREST-BRG1-Komplex orchestriert es die kalziumabhängige Transkriptionsaktivierung, indem es die Repressor-Freisetzung und die Rekrutierung von Aktivatoren an Promotoren wie c-FOS und NR2B koordiniert.
• Es fungiert als Korepressor für ZEB1 und rekrutiert die Maschinerie, die die E-Cadherin-Transkription unterdrückt, einen kritischen Schritt im epithelial-mesenchymalen Übergang (EMT). Verwandte Referenzen: PMID:20418909
• Die subzelluläre Lokalisierung ist überwiegend nukleär, was mit seiner Chromatin-Remodellierungsaktivität übereinstimmt.
• Zu den wichtigsten strukturellen Merkmalen gehören eine ATPase/Helikase-Domäne, eine Bromodomäne zur Acetyl-Lysin-Erkennung und mehrere regulatorische Regionen; es unterliegt Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität modulieren.
• Auf Proteinebene kolokalisiert es mit ZEB1 in E-Cadherin-negativen Zellen des normalen Kolonstromas und an der Invasionsfront kolorektaler Karzinome, was auf eine Rolle bei der Tumorinvasion hindeutet.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus den Aminosäuren 200–300 von humanem BRG1/SMARCA4; diese Region kann über Spezies hinweg (Human, Maus, Ratte) konserviert sein, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für den Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~185 kDa; stellen Sie einen ausreichenden Proteintransfer und eine Membranblockierung für hochmolekulare Proteine sicher.
• Bei der Immunfluoreszenz (IF/ICC) und Immunhistochemie (IHC-P) sollte die nukleäre Lokalisierung von BRG1/SMARCA4 ein spezifisches nukleäres Signal ergeben; verwenden Sie geeignete Fixierungs- und Permeabilisierungsmethoden.
• Für ELISA bietet die monoklonale Natur dieses Antikörpers eine hohe Spezifität; erwägen Sie die Paarung mit Capture/Detektionsantikörpern, die nicht überlappende Epitope anzielen.
• Validieren Sie die Antikörperleistung in Ihren spezifischen Zelllinien oder Gewebetypen, insbesondere solchen, die für EMT, Neuralentwicklung oder Krebsforschung relevant sind.

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