Anti-BRD4 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - O60885

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: BRD4-Funktion und Lokalisierung

• BRD4 (Bromodomain-containing protein 4, auch bekannt als HUNK1) ist ein Chromatin-Reader-Protein, das acetylierte Histone erkennt und eine Schlüsselrolle bei der Übertragung des epigenetischen Gedächtnisses über Zellteilungen hinweg spielt.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:20871596 PMID:23086925 PMID:23317504
• Es bleibt während des gesamten Zellzyklus mit acetyliertem Chromatin assoziiert, um den Chromatinstatus zu bewahren und die Hochstruktur aufrechtzuerhalten, was ein Gedächtnis für die postmitotische Gentranskription bietet.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:22334664 PMID:23317504 PMID:23589332
• Während der Interphase reguliert BRD4 die signalinduzierte Gentranskription durch Rekrutierung des P-TEFb-Komplexes an Promotoren und distale Enhancer. Es arbeitet mit JMJD6 zusammen, um P-TEFb zu aktivieren und die Phosphorylierung der CTD von RNA-Polymerase II zu fördern.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240
• BRD4 fördert auch die Phosphorylierung von 'Ser-2' der CTD von RNA-Polymerase II, entweder durch Rekrutierung von P-TEFb oder über eine berichtete intrinsische Kinaseaktivität, die weitere In-vivo-Beweise erfordert.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:23086925 PMID:22509028
• Es erkennt acetyliertes RELA und verstärkt die transkriptionelle Aktivierung von NF-kappa-B durch Rekrutierung des P-TEFb-Komplexes.
  Verwandte Referenzen:
  PMID:19103749
• BRD4 fungiert als Chromatin-Isolator in der DNA-Schadensantwort, rekrutiert den Condensin-2-Komplex an acetylierte Histone und begrenzt die Ausbreitung der H2AX-Phosphorylierung.
• Subzellulär lokalisiert sich BRD4 im Zellkern und assoziiert mit Chromosomen.
• Es ist ubiquitär in Geweben exprimiert und unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung und Acetylierung; es enthält Bromodomänen und ist an Wirt-Virus-Interaktionen und Krankheitsvarianten beteiligt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid innerhalb der Aminosäuren 100–200 von menschlichem BRD4, was darauf hindeutet, dass der Antikörper ein Epitop in diesem N-terminalen Bereich erkennen könnte.
• Für Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~152 kDa; erwägen Sie die Verwendung eines geeigneten Gel-Prozentsatzes und verlängerte Transferzeiten für solche hochmolekularen Proteine. Validieren Sie mit positiven und negativen Kontrollen im entsprechenden Probensystem.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) können die Antigen-Retrieval-Bedingungen (z. B. Citrat- oder EDTA-Puffer, wärmeinduziert) für Ihren spezifischen Gewebetyp optimiert werden. Da BRD4 ubiquitär exprimiert wird, fügen Sie geeignete Gewebekontrollen hinzu.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; eine Kombination mit geeigneten Antikörpern und eine Validierung mit rekombinantem BRD4-Protein oder Zelllysaten wird empfohlen.

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