Anti-BRAF V600E monoklonaler Antikörper für WB - P15056

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: BRAF-Funktion und Lokalisation

• BRAF (Proto-Onkogen B-Raf) ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die mitogene Signale von der Zellmembran zum Zellkern weiterleitet.
• Es phosphoryliert MAP2K1 und aktiviert damit den MAP-Kinase-Signaltransduktionsweg. Verwandte Referenzen: PMID:21441910 / PMID:29433126
• Es phosphoryliert PFKFB2 und trägt so zur metabolischen Regulation bei. Verwandte Referenzen: PMID:36402789
• BRAF könnte eine Rolle bei den postsynaptischen Reaktionen von Hippocampus-Neuronen spielen. Verwandte Referenzen: PMID:1508179
• Es befindet sich im Zellkern, im Zytoplasma und in der Zellmembran.
• BRAF wird hauptsächlich im Gehirn und in den Hoden exprimiert.
• Das Protein unterliegt umfangreichen regulatorischen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, und enthält eine Zinkfinger-Domäne. Die V600E-Mutation führt zu konstitutiver Kinaseaktivität und ist ein wichtiger onkogener Treiber.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen-Peptid umfasst die Aminosäuren 507–606 und deckt das V600-Codon ab; daher ist dieser Antikörper für den Nachweis der BRAF-V600E-Mutante konzipiert.
• Für Western Blotting beträgt das erwartete Molekulargewicht ~84 kDa. Validieren Sie dies mit humanen Zelllinien, von denen bekannt ist, dass sie die V600E-Mutation exprimieren, sowie mit Wildtyp-Kontrollen.
• Für Immunfluoreszenz und Immunzytochemie optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen entsprechend dem zellulären Kontext.
• Führen Sie bei ELISA in Betracht, mit dem immunisierenden Peptid oder rekombinantem mutiertem BRAF-Protein zu beschichten, um die Antikörperspezifität zu bewerten.
• Für den Menschen wird Kreuzreaktivität angegeben; die Reaktivität mit anderen Spezies sollte individuell getestet werden.

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