Anti-BNP-Polyklonaler Antikörper für WB, IF, IHC, ELISA - P16860

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: BNP-Funktion und -Lokalisierung

• BNP (Brain Natriuretic Peptide) wird zunächst als das Vorprohormon PreproBNP synthetisiert, welches zu proBNP verarbeitet und weiter in das biologisch aktive 32-Aminosäure-Peptid (BNP-32) und das N-terminale Fragment NT-proBNP gespalten wird.
• Als kardiales Hormon bindet BNP spezifisch an den NPR1-Rezeptor, stimuliert die cGMP-Produktion und löst Vasorelaxation und natriuretische Reaktionen aus (PubMed:1672777, PubMed:17349887, PubMed:17372040).
  Verwandte Referenzen: PMID:1672777, PMID:17349887, PMID:17372040
• BNP spielt eine kritische Rolle bei der Aufrechterhaltung der kardio-renalen Homöostase, indem es Diurese und Natriurese fördert sowie die Sekretion von Renin und Aldosteron hemmt (PubMed:1914098, PubMed:9458824).
  Verwandte Referenzen: PMID:1914098, PMID:9458824
• Das Peptid interagiert auch mit dem Clearance-Rezeptor NPR3, der seine zirkulierenden Spiegel und Bioaktivität moduliert (PubMed:16870210).
  Verwandte Referenzen: PMID:16870210
• BNP wird sezerniert und hauptsächlich im kardialen Vorhofgewebe nachgewiesen, die Expression findet sich jedoch auch in den distalen Tubuli der Niere und in der hypertrophen Zone der Chondrozyten der Wachstumsplatte der Knochen.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen eine Disulfidbrücke und Glykosylierung; BNP gehört zur Familie der natriuretischen Peptide und wird als vasodilatatorisches Hormon mit pharmazeutischer Relevanz klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 35–134 des humanen BNP und deckt die Propeptidregion ab, die die reife BNP-32-Sequenz enthält; daher kann der polyklonale Antikörper sowohl das Vorläuferprotein (proBNP, ~15 kDa) als auch verarbeitete Formen erkennen.
• Für den Western Blot (WB) sind Bänder in der Nähe von 15 kDa für proBNP zu erwarten, sowie möglicherweise kleinere Bänder, die dem reifen BNP oder Abbauprodukten entsprechen. Optimieren Sie die Probenvorbereitung und die reduzierenden Bedingungen, um Epitope zu erhalten.
• Validieren Sie in der Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) die Färbung in positiven Kontrollgeweben wie menschlichen Herzvorhöfen oder distalen Nierentubuli. Antigen-Retrieval-Methoden und Antikörperverdünnung sollten empirisch bestimmt werden.
• Für ELISA-Anwendungen sollten Sie diesen polyklonalen Antikörper mit einem passenden monoklonalen Antikörper paaren, um einen empfindlichen Sandwich-Assay zum Nachweis von BNP oder NT-proBNP aufzubauen.

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