Anti-BNIP3 polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - Q12983

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: BNIP3-Funktion und Lokalisierung

• BNIP3 (BCL2/Adenovirus E1B 19 kDa protein-interacting protein 3) ist ein pro-apoptotisches Mitglied der BCL2-Familie, das die BCL2-vermittelte Überlebensunterdrückung überwinden und an der Umverteilung von Kalzium zwischen intrazellulären Speichern teilnehmen kann.
• Es spielt eine Schlüsselrolle bei der mitochondrialen Qualitätskontrolle, indem es mit SPATA18/MIEAP interagiert und den Abbau geschädigter mitochondrialer Proteine über den MALM-Pfad (mitochondrialer Protein-Katabolismus) antreibt.
• Zusammen mit BNIP3L/NIX reguliert BNIP3 die Bildung einer Pore in der mitochondrialen Doppelmembran, was den Transfer lysosomaler Proteine in die mitochondriale Matrix für den Organellenumsatz ermöglicht.
• BNIP3 ist am Calprotectin (S100A8/A9)-induzierten Zelltod beteiligt und verbindet angeborene Immunsignale mit mitochondrialer Dysfunktion und apoptotischer Ausführung.
• Das Protein wird über eine C-terminale Transmembrandomäne in der äußeren Mitochondrienmembran lokalisiert, und seine Aktivität wird durch Phosphorylierung moduliert.
• BNIP3 wurde in Wirt-Virus-Interaktionen impliziert, wirkt viralen anti-apoptotischen Faktoren wie dem Adenovirus E1B 19K entgegen und ist Teil des Referenzproteoms mit einem berechneten Molekulargewicht von ~21,5 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot detektiert der Antikörper unter reduzierenden Bedingungen ein Band bei ca. 22 kDa; für eine optimale Auflösung sollte ein 12–15%iges SDS-PAGE-Gel verwendet werden.
• Validieren Sie die Reaktivität in humanen, murinen oder Rattensystemen (Zelllinien oder Gewebelysate); führen Sie geeignete positive (z. B. mit Hypoxie oder Apoptose-Induktoren behandelte Zellen) und negative Kontrollen mit.
• Für IHC-P führen Sie eine Antigen-Demaskierung (z. B. Citratpuffer, pH 6.0) durch und titrieren Sie den Primärantikörper, um den Hintergrund zu minimieren; validieren Sie in relevanten Gewebeschnitten (z. B. Herz, Skelettmuskel oder Tumorbiopsien).
• In ELISA kann der Antikörper nach Bestätigung der Bindungsaffinität gegen rekombinantes oder natives BNIP3 als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden.
• Da BNIP3 ein Membranprotein ist, verwenden Sie milde Lysepuffer (z. B. RIPA mit Proteaseinhibitoren) und vermeiden Sie übermäßiges Kochen der Proben, um Aggregation zu verhindern.

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