Anti-Bmi1 Polyklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - P35226

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Bmi1-Funktion und Lokalisierung

• Bmi1 (PCGF4/RNF51) ist eine Kernkomponente von Polycomb-repressiven Komplex-1 (PRC1)-ähnlichen Komplexen, die für die Aufrechterhaltung des transkriptionell reprimierten Zustands vieler Entwicklungsgene, einschließlich Hox-Genclustern, essentiell sind.
• Der PRC1-Komplex vermittelt die Monoubiquitinierung von Histon H2A an Lys-119, eine epigenetische Markierung, die Chromatin in seiner Exprimierbarkeit erblich verändert.
  Verwandte Referenzen: PMID:15386022, PMID:16359901, PMID:16714294
• Innerhalb des PRC1-ähnlichen Komplexes stimuliert Bmi1 spezifisch die E3-Ubiquitin-Protein-Ligase-Aktivität von RNF2/RING2 gegenüber nukleosomalem Histon H2A.
  Verwandte Referenzen: PMID:15386022, PMID:21772249, PMID:26151332
• Ein minimaler aktiver Komplex, bestehend aus RNF2, dem Ubiquitin-konjugierenden Enzym UB2D3 und Bmi1, bindet Nukleosomen und zeigt Substratspezifität ausschließlich für nukleosomales Histon H2A.
  Verwandte Referenzen: PMID:21772249, PMID:25355358
• Bmi1 lokalisiert überwiegend im Zellkern, ist aber auch im Zytoplasma zu finden, was seine chromatinmodifizierenden Funktionen und möglicherweise andere extranukleäre Rollen widerspiegelt.
• Als Mitglied der Polycomb-Gruppe der RING-Finger-Proteinfamilie enthält Bmi1 eine Zinkfinger-Domäne und wird als Proto-Onkogen klassifiziert, was seine Bedeutung für Zellproliferation und Stammzellerhaltung unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem C-terminalen Peptid (Aminosäuren 200–300) von humanem Bmi1; ziehen Sie in Betracht, die Spezifität mit Knockout- oder siRNA-behandelten Proben zu überprüfen.
• Beim Western Blotting beträgt das erwartete Molekulargewicht etwa 37 kDa; optimieren Sie die Blockierung und Antikörperverdünnung mit positiven Kontrolllysaten (z. B. HeLa, HEK293T).
• Für die Immunpräzipitation kann der Antikörper interagierende PRC1-Komponenten co-präzipitieren; schließen Sie Isotypkontrollen ein und validieren Sie die Co-IP-Bedingungen.
• Die ELISA-Leistung sollte durch Vergleich des Signals mit bekannten Bmi1-positiven und negativen Kontrollproben bewertet werden.
• Aufgrund der polyklonalen Natur ist eine Charge-zu-Charge-Variabilität möglich; titrieren Sie den Antikörper individuell und bestätigen Sie die Kreuzreaktivität in Maus-/Rattenmodellen mit geeigneten Kontrollen.

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