Anti-BMAL1 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA – O00327

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von BMAL1

• BMAL1 (ARNTL) ist ein Transkriptionsfaktor der basischen Helix-Schleife-Helix-PAS-Familie, der eine Kernkomponente der circadianen Uhr bildet. Es bildet Heterodimere mit CLOCK oder NPAS2, um die Expression von Uhrgenen und uhrkontrollierten Genen über E-Box-Elemente zu steuern und tägliche physiologische Rhythmen zu regulieren.
• Das CLOCK-BMAL1-Heterodimer erkennt kanonische (5′-CACGTG-3′) und nicht-kanonische E-Box-Motive, mit einem bevorzugten Bindungsmotiv von 5′-CACGTGA-3′. BMAL1 bindet die GTGA-Halbseite, während CLOCK an CAC bindet (PubMed:23229515). Verwandte Referenzen: PMID:23229515
• BMAL1 spielt eine entscheidende Rolle bei der rhythmischen Chromatinöffnung, und der BMAL1-CLOCK-Komplex reguliert die circadiane Expression zahlreicher Gene, die am Stoffwechsel beteiligt sind – darunter SERPINE1, NAMPT, DBP und PPARGC1A – und verbindet so die Uhr mit der Stoffwechsehomeostase.
• Über die Kernuhr hinaus hat BMAL1 gewebespezifische Funktionen: Es fördert die Myogenese gegenüber der Adipogenese über den kanonischen Wnt-Signalweg, reguliert die Funktion pankreatischer β-Zellen und die glucosestimulierte Insulinsekretion, steuert den rhythmischen Monozytenverkehr und unterstützt die adulte hippocampale Neurogenese.
• BMAL1 unterliegt umfangreichen posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung, die seine Stabilität, Aktivität und Periodenlänge modulieren. Die CLOCK-vermittelte Acetylierung von ASS1 ist BMAL1-abhängig (PubMed:28985504). Verwandte Referenzen: PMID:28985504
• Subzellulär pendelt BMAL1 zwischen Zellkern und Zytoplasma und lokalisiert an PML-Kernkörperchen; es wird in hohem Maße in Gehirn, Skelettmuskel, Herz und Haarfollikeln exprimiert.
• Im Kontext von Infektionen reguliert BMAL1 den Eintritt und die Replikation von SARS-CoV-2 in Lungenepithelzellen, wahrscheinlich durch posttranskriptionelle Modulation von ACE2 und interferonstimulierten Genen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 380–510, einer Region außerhalb der bHLH- und PAS-Domänen; diese Auswahl kann die Kreuzreaktivität mit anderen bHLH-PAS-Proteinen verringern und die Detektion von vollständigen BMAL1 verbessern.
• Für das Western Blotting sollte eine erwartete Bande nahe 69 kDa in Extrakten von menschlichen, Maus- und Rattenzellen (z. B. HeLa, Mausgehirn, Rattenleber) beobachtet werden. Verwenden Sie geeignete Beladungskontrollen und erwägen Sie eine Kernextraktion zur Anreicherung des Signals.
• Für ELISA-Anwendungen optimieren Sie die Beschichtungskonzentration des rekombinanten Immunogens oder des nativen Proteins und validieren Sie die Spezifität mit Hilfe von Konkurrenzassays oder Knockout-Modellen.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ist zu erwarten; dennoch wird ein Sequenzabgleich der Immunogenregion zwischen den Arten empfohlen, um die Erhaltung des Epitops zu bestätigen.

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