Monoklonaler Anti-BMAL1-Antikörper für WB, ELISA – O00327

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von BMAL1

• BMAL1 (Basic helix-loop-helix ARNT-like protein 1) ist ein Transkriptionsaktivator, der mit CLOCK oder NPAS2 ein Heterodimer bildet, um die Transkription von Genen mit E-Box-Elementen zu aktivieren. Er stellt einen zentralen positiven Baustein der circadianen Uhr dar.
• Die molekulare circadiane Uhr besteht aus ineinander greifenden Transkriptions-Translations-Rückkopplungsschleifen: CLOCK/NPAS2-BMAL1-Heterodimere aktivieren Period-(PER) und Kryptochrom-(CRY)-Gene, deren Proteinprodukte die CLOCK/NPAS2-BMAL1-Aktivität hemmen. Dadurch entstehen ~24-stündige Oszillationen der Genexpression.
• Das CLOCK-BMAL1-Heterodimer bindet bevorzugt an das E-Box-Motiv 5'-CACGTGA-3', wobei BMAL1 die 3'-Halbseite 5'-GTGA-3' erkennt; es erkennt auch nicht-kanonische Motive 5'-AACGTGA-3' und 5'-CATGTGA-3'. Verwandte Referenzen: PMID:23229515
• BMAL1 reguliert die Myogenese positiv und die Adipogenese negativ über Wnt-Pathway-Gene; in Pankreas-Beta-Zellen steuert es die glucosestimulierte Insulinsekretion über NRF2-vermittelte Antioxidansgenexpression und reguliert die mTORC1-Signalisierung negativ.
• Es fördert die rhythmische Chromatinöffnung und ist essenziell für die rhythmische Interaktion von CLOCK mit ASS1, wobei es die CLOCK-vermittelte Acetylierung von ASS1 positiv reguliert. Verwandte Referenzen: PMID:28985504
• Weitere Funktionen umfassen die Regulation der adulte Hippocampus-Neurogenese, die tägliche Kontrolle des Skelettmuskelstoffwechsels (über DGAT2 und COQ10B) und die rhythmische Rekrutierung von entzündlichen Ly6C-Monozyten durch PRC2-vermittelte Chemokinexpression.
• Es lokalisiert sich im Zellkern, Zytoplasma und an PML-Körperchen; es unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung (Isopeptidbindung).
• Es wird stark im erwachsenen Gehirn, Skelettmuskel, Herzen und Haarfollikeln exprimiert; es ist zudem an der Regulation des Eintrags und der Replikation von SARS-CoV-2 in Lungenepithelzellen beteiligt.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 500–600 von humanem BMAL1 umfasst; beachten Sie, dass Epitope in variablen oder konservierten Regionen liegen können. Validieren Sie die Artkreuzreaktivität in Ihrem spezifischen experimentellen Kontext.
• Für Western Blot (WB) beträgt die vorausgesagte Proteinmasse ~69 kDa; überprüfen Sie eine angemessene Probenvorbereitung und Beladungskontrollen. Die Artreaktivität ist für Mensch, Maus und Ratte bestätigt.
• Für ELISA-Anwendungen optimieren Sie die Beschichtungsantigen- und Antikörperverdünnung mit standardmäßigen Schachbretttiterungen. Beachten Sie, dass Protokolldetails (direkte, indirekte, Sandwich-ELISA) empirisch ermittelt werden müssen.
• Angesichts der circadianen Expression von BMAL1 sollten Sie Effekte der Tageszeit bei der Probenentnahme bei der Versuchsplanung berücksichtigen.

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