Anti-BiP/GRP78 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P11021

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: BiP/GRP78 Funktion und Lokalisierung

• BiP/GRP78, auch bekannt als 78 kDa glucose-regulated protein (GRP-78), Binding-immunoglobulin protein (BiP) und Heat Shock Protein Family A Member 5 (HSPA5), ist ein Mitglied der HSP70-Familie von Chaperonen, die vom HSPA5-Gen kodiert wird. Es ist hauptsächlich im Lumen des endoplasmatischen Retikulums (ER) lokalisiert, kann aber unter bestimmten Bedingungen auch in Melanosomen, im Zytoplasma und auf der Zelloberfläche gefunden werden.
• BiP spielt eine zentrale Rolle bei der Faltung von ER-Proteinen und der Qualitätskontrolle, indem es die korrekte Proteinfaltung erleichtert und terminal fehlgefaltete Proteine für den Abbau markiert. Diese Funktion beinhaltet die Wechselwirkung mit Kofaktoren wie DNAJC10/ERdj5. Verwandte Referenzen: PMID:2294010, PMID:23769672, PMID:23990668
• Als Hauptregulator der unfolded protein response (UPR) bindet und inaktiviert BiP die ER-Stress-Sensoren EIF2AK3/PERK und ERN1/IRE1 unter nicht-stressigen Bedingungen. Die Ansammlung fehlgefalteter Proteine führt zur Freisetzung von BiP, was die UPR-Aktivierung und nachgelagerte Signalwege auslöst. Verwandte Referenzen: PMID:11907036, PMID:1550958, PMID:19538957
• BiP ist an der posttranslationalen Translokation kleiner präsekretorischer Proteine über die ER-Membran beteiligt, möglicherweise durch Modulation des SEC61-Translocons. Es kann auch zur Apoptose und Zellproliferation beitragen. Verwandte Referenzen: PMID:26045166
• BiP kann als Rezeptor für mehrere Viren dienen, einschließlich Dengue-Virus, Zika-Virus und Japan-Enzephalitis-Virus, und deren Anheftung und Eintritt in Wirtszellen erleichtern. Darüber hinaus dient es als Rezeptor für CotH-Proteine von Mucorales-Pilzen und spielt eine Rolle bei der epithelialen Invasion während der Mukormykose. Verwandte Referenzen: PMID:15098107, PMID:28053106, PMID:33432092, PMID:20484814, PMID:24355926, PMID:32487760
• BiP enthält konservierte HSP70-ATPase- und Substratbindedomänen und unterliegt verschiedenen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Acetylierung, Phosphorylierung, Methylierung, Nitrierung und Ubiquitinierung.
• Das berechnete Molekulargewicht von BiP/GRP78 beträgt ca. 72,3 kDa, wie aus seiner Aminosäuresequenz bestimmt (UniProt: 72333 Da).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 531-630 von menschlichem BiP/GRP78 (NP_005338.1), einem Bereich, der bei Mensch, Maus, Ratte und Schwein konserviert ist, was zur breiten Kreuzreaktivität des Antikörpers beitragen kann.
• Für die Western Blot-Analyse wird ein spezifisches Band bei ca. 72 kDa erwartet; validieren Sie die Spezifität mit geeigneten positiven und negativen Kontrollen und erwägen Sie Antigen-Blockierungs-Experimente.
• Die Eignung des Antikörpers für IF/ICC und IHC-P deutet auf Potenzial für Studien zur zellulären Lokalisierung hin; optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen für ER-residente Proteine.
• Da BiP in mehreren subzellulären Kompartimenten (ER, Melanosom, Zytoplasma, Zelloberfläche) vorkommt, kann eine Co-Färbung mit organellespezifischen Markern oder eine subzelluläre Fraktionierung für eine definitive Lokalisierung von Vorteil sein.

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