Anti-Biotinidase (BTD) polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – P43251

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der Biotinidase

• Biotinidase (BTD) ist ein sezerniertes Enzym, das die Freisetzung von Biotin aus Biocytin katalysiert – einem Abbauprodukt biotinabhängiger Carboxylasen.
• Das Enzym ist entscheidend für das Biotin-Recycling und die Aufrechterhaltung von freien Biotinpools, die für die Carboxylase-Aktivität bei der Fettsäuresynthese, Glukoneogenese und Aminosäurekatabolismus essenziell sind.
• Biotinidase wird in den extrazellulären Raum sezerniert, wo es auf Biocytin wirkt, das aus dem proteolytischen Abbau von Carboxylasen stammt.
• Das BTD-Gen unterliegt alternativem Spleißen, wodurch mehrere Transkriptvarianten entstehen; das Protein ist ein Glykoprotein, wie posttranslationale Modifikationen zeigen.
• Mutationen in BTD sind mit Biotinidasemangel verbunden, einer Erkrankung, die durch neurologische und kutane Symptome aufgrund eines gestörten Biotin-Recyclings gekennzeichnet ist.
• Das Enzym gehört zur Nitrilase/Cyanid-Hydratase-Superfamilie und fungiert als Hydrolase, die die Amidbindung von Biocytin spaltet.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der C-terminalen Region (Reste 284–543) der humanen Biotinidase, was die Detektion von Volllängenprotein und bestimmten Isoformen mit diesem Segment ermöglicht.
• Für den Western Blot (WB) ist aufgrund des Immunogens eine Bande um 61 kDa zu erwarten; beachten Sie, dass Glykosylierung und alternatives Spleißen zu geringfügigen Größenabweichungen führen können.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) sollten Antigen-Retrieval-Bedingungen und Gewebefixierung optimiert werden; validieren Sie in Leber- oder Nierenschnitten, in denen bekanntermaßen Biotinidase produziert wird.
• Im ELISA kann der Antikörper für Capture oder Detektion verwendet werden; bestätigen Sie die Reaktivität gegen rekombinante Biotinidase oder natives Protein in biologischen Flüssigkeiten.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte wurde nachgewiesen; führen Sie jedoch eine artspezifische Validierung durch, wenn Sie zwischen Modellsystemen wechseln.

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