Anti-Bif-1 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für IF/ICC, ELISA - Q9Y371

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Bif-1

• Endophilin-B1 (Bif-1, SH3GLB1) ist ein 41 kDa großes Protein, das beim Menschen vom SH3GLB1-Gen kodiert wird. Es existiert in zwei alternativ gespleißten Isoformen mit unterschiedlichen Funktionen: Isoform 1 fördert die Apoptose, während Isoform 2 die neuronale Lebensfähigkeit schützt.
• Bif-1 spielt eine entscheidende Rolle für die Dynamik der äußeren Mitochondrienmembran und ist für normale Morphologie und Funktion von Mitochondrien erforderlich.
  Verwandte Referenzen: PMID:15452144
• Es ist ein zentraler Mediator der caspase-abhängigen Apoptose durch Förderung der BAX/BAK1-Aktivierung und ist zudem am caspase-unabhängigen Zelltod bei Nährstoffmangel beteiligt.
  Verwandte Referenzen: PMID:16227588
• Bif-1 aktiviert die Lipidkinase PIK3C3 (VPS34) während der Autophagie durch Assoziation mit dem PI3K-Komplex II (PI3KC3-C2) und reguliert so die Autophagiosomenbildung und den ATG9A-Transport vom Golgi-Apparat.
  Verwandte Referenzen: PMID:17891140 PMID:21068542
• Es beteiligt sich an Membranumbauvorgängen, einschließlich der Tubulierung und Fragmentierung der Golgi-Membran, und kann die Membranfusion durch Rekrutierung von Proteinen an Membranen mit hoher Krümmung fördern.
  Verwandte Referenzen: PMID:11604418
• Subzellulär lokalisiert sich Bif-1 im Zytoplasma, am Golgi-Apparat, an der äußeren Mitochondrienmembran, an der Autophagiosomenmembran und am Mittelkörper während der Zytokinese.
• Die Gewebeexpression ist am höchsten in Herz, Skelettmuskel, Niere und Plazenta, mit niedrigeren Werten in Gehirn, Dickdarm, Thymus, Milz, Leber, Dünndarm, Lunge und peripheren Blutleukozyten.
• Posttranslational unterliegt Bif-1 der Acetylierung und Phosphorylierung; es verfügt über eine SH3-Domäne und Coiled-Coil-Regionen, die für Proteininteraktionen und die Membranassoziation entscheidend sind.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Verwenden Sie für IF/ICC eine geeignete Fixierung (z. B. 4 % PFA) und Permeabilisierung (z. B. 0,1 % Triton X-100). Fügen Sie einen Blockierschritt mit 5 % BSA hinzu, um den Hintergrund zu reduzieren.
• Führen Sie im ELISA eine Verdünnungsreihe (z. B. beginnend bei 1:500) durch, um die optimale Antikörperkonzentration für Ihr spezifisches Antigenbeschichtungs- und Detektionssystem zu ermitteln.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität in menschlichen Zelllinien, die bekanntermaßen Bif-1 exprimieren, wie HeLa oder HEK293. Fügen Sie eine Negativkontrolle (z. B. siRNA-Knockdown) hinzu, um die Zielerkennung zu bestätigen.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, beachten Sie potenzielle Chargenvariabilität; wir empfehlen, jede neue Charge in Ihrem Assay zu qualifizieren.

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