Anti-beta-2-Mikroglobulin Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P61769

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von beta-2-Mikroglobulin

• Beta-2-Mikroglobulin (B2M) ist die leichte Kette des Haupthistokompatibilitätskomplexes der Klasse I (MHC I), essenziell für die Präsentation von Peptidantigenen gegenüber CD8+-T-Zellen und spielt dadurch eine entscheidende Rolle bei der adaptiven Immunität.
• Es handelt sich um ein sezerniertes Protein, das auch auf der Zelloberfläche nichtkovalent mit der schweren Kette von MHC I assoziiert vorkommt; seine Faltung und Assemblierung sind entscheidend für die stabile Expression von MHC I.
• Das exogene Mycobacterium tuberculosis EsxA-Protein bindet an B2M und reduziert dessen Export zur Zelloberfläche, wodurch möglicherweise die Klasse-I-Antigenpräsentierung beeinträchtigt wird (PubMed:25356553).
  Verwandte Referenzen: PMID:25356553
• Strukturell enthält B2M eine immunglobulinähnliche Domäne und wird durch eine intramolekulare Disulfidbrücke (Cys25-Cys80) stabilisiert. Es handelt sich um ein Glykoprotein, das posttranslationale Modifikationen wie Glykierung und N-terminale Pyroglutamatbildung durchläuft.
• Mutationen in B2M sind mit familiärer hyperkatabolischer Hypoproteinämie und Amyloidose verbunden, bei der es fibrilläre Ablagerungen in Geweben bilden kann, insbesondere bei dialyseassoziierter Amyloidose.
• Trotz seiner geringen Größe (theoretisch ~13,7 kDa) läuft Beta-2-Mikroglobulin unter reduzierenden Bedingungen auf SDS-PAGE bei etwa 14 kDa auf.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der reifen sezernierten Form (Aminosäuren 21-119), ohne das Signalpeptid; der Antikörper kann sowohl reduziertes als auch nicht reduziertes B2M erkennen, aber für konsistente Ergebnisse validieren Sie unter denaturierenden und reduzierenden Bedingungen (z. B. Erhitzen auf 95°C mit DTT), um Disulfidbrücken aufzubrechen.
• Laden Sie für Western Blot 10–30 µg Gesamtzelllysat oder konzentriertes Serum auf und verwenden Sie eine Positivkontrolle wie lymphozytenreiches Gewebe (Milz, Lymphknoten) oder Zelllinien, die MHC I exprimieren.
• Führen Sie bei Immunhistochemie an formalinfixierten paraffineingebetteten (IHC-P) Schnitten Antigen-Retrieval mit Citratpuffer (pH 6,0) oder EDTA-Puffer (pH 9,0) durch und erwägen Sie einen Titrationsexperiment zur Optimierung der Färbeintensität.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus- und Ratten-B2M, wodurch er für Nagetiermodelle geeignet ist; überprüfen Sie die Sequenzhomologie und testen Sie relevante Gewebslysate, um die Speziesreaktivität zu bestätigen.
• Für ELISA kann er als Capture- oder Detektionsantikörper verwendet werden; die Paarung mit einem anderen Klon, der ein anderes Epitop erkennt, kann die Empfindlichkeit in Sandwich-Assays verbessern. Optimieren Sie Beschichtungspuffer und Verdünnungsfaktoren.
• Aufgrund der Sekretion von B2M können zellfreie Proben analysiert werden; bei niedrig abundanten Targets kann eine Anreicherung durch Immunpräzipitation oder Konzentration erforderlich sein.

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