Anti-Beclin 1 Kaninchen monoklonaler Antikörper (KO-validiert) für WB und ELISA - Q14457

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Beclin 1 Funktion und Lokalisierung

• Beclin-1 spielt eine zentrale Rolle in der Autophagie als Kerneinheit des Klasse III Phosphatidylinositol-3-Kinase (PI3K)-Komplexes, vermittelt die Bildung von Phosphatidylinositol-3-phosphat; unterschiedliche Komplexformen (PI3KC3-C1 und PI3KC3-C2) treiben die Initiierung bzw. Reifung des Autophagosoms an (PubMed:18570871, PubMed:21358617, PubMed:23184933).
  Verwandte Referenzen: PMID:18570871 PMID:21358617 PMID:23184933

• Es ist auch am degradativen endozytischen Transport, der Endozytose und dem Ablösungsschritt der Zytokinese beteiligt, wahrscheinlich im Kontext von PI3KC3-C2 (PubMed:20208530, PubMed:20643123, PubMed:23974797, PubMed:25275521).
  Verwandte Referenzen: PMID:20208530 PMID:20643123 PMID:23974797 PMID:25275521

• Beclin-1 lokalisiert breit im Zytoplasma, Golgi-Apparat, Trans-Golgi-Netzwerk-Membran, Endosomenmembran, endoplasmatischer Retikulum-Membran, mitochondrialer Membran, Autophagosomen und dem Zellkern, was mit seinen vielfältigen Transport- und Signalwegsfunktionen übereinstimmt.

• Ein C-terminales 35 kDa Fragment (Beclin-1-C) lokalisiert spezifisch in Mitochondrien, wo es die Apoptose durch Induktion der BAX-Translokation und die Freisetzung pro-apoptotischer Faktoren fördern kann.

• Es trägt zur antiviralen Wirtsabwehr bei; zum Beispiel schützt es vor Infektion durch einen neurovirulenten Stamm des Sindbis-Virus.

• Die Expression von Beclin-1 ist ubiquitär, was seine grundlegende Rolle in der zellulären Homöostase unterstreicht.

• Das Protein unterliegt multiplen posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung (wie durch Keywords: Phosphoprotein, Acetylation, Ubl conjugation, Isopeptide bond angezeigt), die seine Aktivität in Autophagie und Apoptose modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die N-terminalen 280 Aminosäuren und deckt kritische funktionelle Domänen ab; dieses Design kann den Nachweis sowohl von vollständigem Beclin-1 (~52 kDa) als auch der 35 kDa mitochondrialen Isoform in einigen Kontexten ermöglichen.
• Für Western Blotting sollten Gesamtzelllysate von humanen, Maus- oder Rattenzellen verwendet werden. Während das vorhergesagte Molekulargewicht 52 kDa beträgt, kann die Bande aufgrund posttranslationaler Modifikationen nahe 60 kDa erscheinen; validieren Sie dies, wo verfügbar, mit Knockout-Kontrollen.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper für direkten oder Capture-ELISA verwendet werden; optimale Arbeitsverdünnungen sollten empirisch mit der relevanten Probenmatrix bestimmt werden.
• Da die Beclin-1-Expression durch Autophagie-Stimuli induziert werden kann, können positive Kontrollen (z.B. mit Hunger oder Rapamycin behandelte Zellen) die Assay-Validierung unterstützen.

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