Anti-Beclin 1 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q14457

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Beclin-1-Funktion und -Lokalisierung

• Beclin-1, codiert durch das BECN1-Gen, ist ein zentrales Autophagie-Protein, auch bekannt als ATG6, VPS30 oder coiled-coil Myosin-ähnliches BCL2-interagierendes Protein.
• Beclin-1 fungiert als Kernuntereinheit des Klasse-III-Phosphatidylinositol-3-Kinase-Komplexes (PI3KC3), der Phosphatidylinositol-3-phosphat (PI3P) erzeugt, das für die Bildung und Reifung von Autophagosomen essentiell ist. Verwandte Referenzen: PMID:18570871, PMID:21358617, PMID:23184933
• Beclin-1 existiert in verschiedenen PI3KC3-Komplexen: PI3KC3-C1 ist an der Einleitung der Autophagosomenbildung beteiligt, während PI3KC3-C2 bei der Autophagosome-Reifung und dem endozytischen Transport fungiert. Verwandte Referenzen: PMID:20208530, PMID:20643123, PMID:23974797
• Das Protein lokalisiert sich in mehreren Membrankompartimenten, einschließlich des endoplasmatischen Retikulums, des Golgi-Apparats, der Endosomen, Mitochondrien und Autophagosomen, und kann auch im Zellkern und Zytoplasma gefunden werden.
• Ein 35 kDa C-terminales Fragment von Beclin-1 (Beclin-1-C) lokalisiert sich in den Mitochondrien und fördert die Apoptose durch Induktion der BAX-Translokation und Freisetzung proapoptotischer Faktoren.
• Beclin-1 spielt eine Rolle bei der antiviralen Abwehr und schützt vor neurovirulenter Sindbis-Virus-Infektion.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und ubiquitinähnliche Konjugation, die seine Aktivität in der Autophagie und anderen Prozessen regulieren.
• Beclin-1 ist ubiquitär in menschlichen Geweben exprimiert, was seine grundlegende Rolle für die zelluläre Homöostase unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Aminosäuren 25-280 abdeckt, was einer über Beclin-1 konservierten Region entspricht und wie angegeben eine Kreuzreaktivität mit murinem und Ratten-Beclin-1 bieten kann.
• Für den Western Blot wird eine Bande um 52 kDa in menschlichen, murinen und Rattenproben erwartet; eine kleinere Bande von ~35 kDa, die dem mitochondrialen Beclin-1-C-Fragment entspricht, kann unter bestimmten Bedingungen ebenfalls nachgewiesen werden.
• Für ELISA sollte in Betracht gezogen werden, diesen Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz in autophagiebezogenen Assays zu verwenden.
• Aufgrund der ubiquitären Expression von Beclin-1, stellen Sie sicher, dass geeignete Ladungskontrollen verwendet werden, und erwägen Sie gewebespezifische Modelle zur Induktion der Autophagie.
• Der Antikörper ist möglicherweise geeignet, um Beclin-1 in mehreren zellulären Fraktionen nachzuweisen, aber eine Optimierung der Probenvorbereitung (z. B. Anreicherung von Membranen) wird empfohlen.

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