Anti-BCL6-Monoklonaler Antikörper () für intrazelluläre Durchflusszytometrie - P41182

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: BCL6-Funktion und -Lokalisierung

• BCL6 (B-Zell-Lymphom 6) ist ein Transkriptionsrepressor, der für die Bildung des Keimzentrums und die Reifung der Antikörperaffinität kritisch ist, kodiert durch das BCL6-Gen (GenID: 604) mit mehreren Isoformen, die durch alternatives Spleißen entstehen.
• Es bindet an die DNA-Konsensussequenz 5'-TTCCTAGAA-3' und rekrutiert Corepressor-Komplexe, einschließlich Histondeacetylasen, um Zielgene zum Schweigen zu bringen, die an Differenzierung, Apoptose und Zellzykluskontrolle in GC-B-Zellen beteiligt sind.
• BCL6 reguliert seine eigene Expression autoregulatorisch und hochreguliert indirekt AICDA durch Repression von MikroRNAs wie miR-155, wodurch es den Klassenwechsel der Immunglobuline und die somatische Hypermutation fördert, während es die p53-abhängige Apoptose unterdrückt.
• In follikulären T-Helferzellen (TFH) steuert BCL6 das TFH-Genprogramm und hemmt die Differenzierung in TH1-, TH2- und TH17-Linien und ist für das immunologische Gedächtnis sowohl in B- als auch T-Zellen unerlässlich.
• Es unterdrückt auch die Makrophagenproliferation durch Konkurrenz mit STAT5 um Bindungsmotive auf Zielgenen wie CCL2 und CCND2 und vermittelt einen Zellzyklusarrest in GC-B-Zellen unter genotoxischem Stress über p53-abhängige und -unabhängige Wege.
• Über die Immunität hinaus kontrolliert BCL6 die Neurogenese durch Veränderung der NOTCH-abhängigen Transkription an Zielen wie HES5, rekrutiert die Deacetylase SIRT1, um epigenetisches Stillschweigen und neuronale Differenzierung zu induzieren.
• Subzellulär lokalisiert sich BCL6 ausschließlich im Zellkern, konsistent mit seiner Rolle als DNA-bindender Transkriptionsfaktor.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Acetylierung, und das Protein verfügt über eine N-terminale BTB/POZ-Domäne und C-terminale Zinkfinger, was es als Zinkfinger-Transkriptionsrepressor klassifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 235–350 (zentraler Bereich außerhalb der BTB-Domäne), was zu einem Antikörper führen kann, der beide Hauptisoformen (72 kDa und 78 kDa) erkennt; validieren Sie die Spezifität in Ihrem Zielzelltyp.
• Da dieser Antikörper direkt mit ABflo® 488 konjugiert ist, eignet er sich für die intrazelluläre Durchflusszytometrie; optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsschritte für Ihr Kernziel, um eine ausreichende Epitop-Zugänglichkeit zu gewährleisten.
• Da BCL6 transient während der GC-B-Differenzierung exprimiert wird, erwägen Sie die Verwendung geeigneter Gating-Strategien und Co-Färbungen mit Markern (z. B. CD38, CD20), um GC-B-Zellen oder TFH-Zellen in Humanproben zu identifizieren.
• Bestätigen Sie die Kreuzreaktivität mit Ihren Proben, da die dokumentierte Reaktivität auf Human beschränkt ist; führen Sie eine zusätzliche Validierung durch, wenn Sie mit nichtmenschlichen Primaten oder anderen Spezies arbeiten.

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