Anti-Bcl-2 Polyklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - P49950

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Bcl-2-Funktion und Lokalisierung

• Bcl-2, kodiert durch das Bcl2-Gen, ist ein Schlüsselprotein gegen Apoptose, das den programmierten Zelltod in verschiedenen Zellsystemen unterdrückt, einschließlich faktorenabhängiger lymphohämatopoetischer und neuraler Zellen.
• Es reguliert den Zelltod, indem es die Permeabilität der Mitochondrienmembran kontrolliert und in einer Rückkopplungsschleife mit Caspasen wirkt. Es hemmt die Caspase-Aktivität, entweder durch Verhinderung der Cytochrom-c-Freisetzung aus Mitochondrien oder durch Bindung an den Apoptose-aktivierenden Faktor APAF-1.
• Über die Apoptose hinaus wirkt Bcl-2 als Inhibitor der Autophagie: Unter Nicht-Hungerbedingungen interagiert es mit BECN1 und AMBRA1, um die Autophagie-Funktion zu unterdrücken.
• Es kann auch Entzündungen abschwächen, indem es die NLRP1-Inflammasom-Aktivierung beeinträchtigt und so die CASP1-Aktivierung und IL1B-Freisetzung reduziert.
• Subzellulär lokalisiert Bcl-2 an der äußeren Mitochondrienmembran, Kernmembran, endoplasmatischen Retikulum-Membran und im Zytoplasma.
• Die Gewebeexpression ist breit, mit den höchsten Werten in Fortpflanzungsgeweben. Im adulten Gehirn findet man es in Mitralzellen des Riechkolbens, hippocampalen Granular- und Pyramidenneuronen, Brückenkernen, Kleinhirn-Granularneuronen und Ependymzellen; die pränatale Gehirnexpression ist im Neuroepithel und der kortikalen Platte höher.
• Das Protein hat ein berechnetes Molekulargewicht von etwa 26,6 kDa und unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Phosphorylierung und Ubiquitinierung (Ubl-Konjugation).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen enthält ein synthetisches Peptid, das den Resten 1–100 von Ratten-Bcl-2 entspricht, was darauf hindeutet, dass der Antikörper die N-terminale Region erkennt. Diese Region kann über Spezies hinweg konserviert sein; die Kreuzreaktivität mit Maus ist bestätigt, aber Tests in weiteren Spezies sollten validiert werden.
• Für Western Blot (WB) geeignete positive Kontrolllysate laden (z.B. von Ratten- oder Mausgeweben/-zellen, die Bcl-2 exprimieren) und ein Band bei ~26 kDa erwarten. Reduzierende Bedingungen werden typischerweise verwendet, aber eine Optimierung kann erforderlich sein.
• Für Immunpräzipitation (IP) die Antikörpermenge titrieren und relevante Isotypenkontrollen einbeziehen. Vorreinigen von Lysaten kann unspezifische Bindung reduzieren.
• Für ELISA kann der Antikörper als Einfang- oder Nachweisreagenz verwendet werden; validieren Sie die Paarung mit einem geeigneten Sekundärantikörper für Ihr Assay-Format.
• Immer geeignete negative Kontrollen zur Beurteilung der Spezifität einbeziehen und Tests im endogenen System von Interesse in Betracht ziehen.

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