Anti-Bak-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – Q16611

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Bak

• Bak, kodiert durch das BAK1-Gen (auch bekannt als BCL2L7, CDN1), ist ein proapoptotisches Mitglied der Bcl-2-Proteinfamilie und besitzt konservierte BH-Domänen (Bcl-2-Homologiedomänen), die für seine Dimerisierung und Funktion entscheidend sind.
• Als kritischer Effektor des mitochondrialen (intrinsischen) Apoptosewegs oligomerisiert Bak nach seiner Aktivierung und bildet Poren in der äußeren Mitochondrienmembran (MOM). Dies führt zur Permeabilisierung der äußeren Mitochondrienmembran (MOMP) und zur Freisetzung von Cytochrom c sowie anderen apoptogenen Faktoren, wodurch nachgeschaltete Caspasen aktiviert werden.
• Zusammen mit seinem eng verwandten Homolog Bax bildet Bak die zentrale porenbildende Maschinerie, die für die mitochondriale Apoptose erforderlich ist, und bringt Signale für das Zellüberleben mit der Ausführung des Zelltods ins Gleichgewicht.
• Bak wird ubiquitär exprimiert, wobei die höchsten Konzentrationen im Herzen und in der Skelettmuskulatur nachgewiesen werden. Es ist hauptsächlich in der äußeren Mitochondrienmembran lokalisiert und dort über seine C-terminale Transmembrandomäne verankert.
• Funktionell wird Bak durch Wechselwirkungen mit antiapoptotischen Bcl-2-Mitgliedern (z. B. Bcl-2, Bcl-XL) und BH3-only-Proteinen reguliert. Seine Aktivität wird außerdem durch posttranslationale Modifikationen, einschließlich Acetylierung, sowie durch Wechselwirkungen mit Metallionen moduliert.
• Neuere Strukturstudien haben die Konformationsänderungen aufgeklärt, die der Aktivierung und Porenbildung von Bak zugrunde liegen, und seine Rolle bei der Reaktion auf zellulären Stress, DNA-Schäden und Entwicklungssignale hervorgehoben.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das rekombinante Protein-Immunogen umfasst die Aminosäuren 11–82 des humanen Bak und deckt eine in Affen konservierte Region ab, was die Kreuzreaktivität bei beiden Arten unterstützt. Eine Validierung der Detektion in Ihrer spezifischen Probenmatrix sollte in Betracht gezogen werden.
• Dieser monoklonale Antikörper wurde vom Anbieter für Western Blot (WB), Paraffin-Immunhistochemie (IHC-P) und ELISA validiert. Für jede Anwendung sollten die optimale Verdünnung und das Protokoll empirisch anhand positiver und negativer Kontrollen bestimmt werden.
• Aufgrund des vorhergesagten Molekulargewichts von 23 kDa (UniProt: 23,4 kDa) ist auf eine ordnungsgemäße Trennung in SDS-PAGE-Gelen zu achten. Außerdem sollte ein geeigneter Molekulargewichtsmarker verwendet werden.

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