Anti-BAF57/SMARCE1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, WB/IF/ICC, IP, ELISA - Q969G3

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: BAF57/SMARCE1 Funktion und Lokalisierung

• BAF57 (SMARCE1) ist eine Kernuntereinheit der ATP-abhängigen SWI/SNF-Chromatin-Remodeling-Komplexe, einschließlich der npBAF- (neuronale Vorläuferzellen) und nBAF-Komplexe (neuronenspezifisch). Es spielt eine kritische Rolle bei der Veränderung von DNA-Histon-Kontakten zur Regulation der Transkription.
• Durch seine Assoziation mit SWI/SNF-Komplexen ist BAF57 an der transkriptionellen Aktivierung und Repression ausgewählter Gene beteiligt, insbesondere während der neuralen Entwicklung. Der Wechsel von npBAF- zu nBAF-Komplexen ist für die Differenzierung von proliferierenden neuralen Stammzellen zu postmitotischen Neuronen unerlässlich.
• BAF57 interagiert mit nuklearen Hormonrezeptoren, wie dem Östrogenrezeptor, und koaktiviert östrogenresponsive Promotoren in Verbindung mit SRC/p160-Histonacetyltransferasen. Darüber hinaus kann es an den CoREST-Corepressor binden, um neuronenspezifische Gene in nicht-neuronalen Zellen zu reprimieren.
• Das Protein lokalisiert ausschließlich im Zellkern, was seiner Rolle beim Chromatin-Remodeling und der transkriptionellen Regulation entspricht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Methylierung und Ubiquitinierung, die seine Aktivität und Stabilität modulieren können. Alternatives Spleißen erzeugt ebenfalls mehrere Isoformen.
• BAF57 enthält eine Coiled-Coil-Domäne und eine DNA-bindende Region, was Protein-Protein-Interaktionen und das Chromatin-Targeting erleichtert. Schlüsselwörter wie „Chromatin-Regulator“, „Neurogenese“ und „Krankheitsvariante“ unterstreichen seine Bedeutung in der neuralen Entwicklung und bei Krankheiten, wobei Mutationen mit geistiger Behinderung in Verbindung gebracht werden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blots werden häufig Ganzzelllysate von HeLa- oder HEK293-Zellen verwendet, um endogenes BAF57 bei ca. 47 kDa nachzuweisen. Die vom Hersteller bereitgestellten KO-Validierungsdaten können als Referenz für die Spezifität dienen.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie wird ein vorwiegend nukleäres Färbemuster erwartet. Optimieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen, um die nukleäre Architektur zu erhalten.
• Die polyklonale Natur dieses Antikörpers kann die Effizienz der Erfassung bei Immunpräzipitationsexperimenten verbessern. Erwägen Sie, den Antikörper an Perlen zu vernetzen, um Störungen durch die schwere Kette bei nachfolgenden Western Blots zu vermeiden.
• Bei der Arbeit mit Maus- oder Rattenproben überprüfen Sie die Kreuzreaktivität, indem Sie positive Kontrolllysate einschließen und geeignete Sekundärantikörper-Kontrollen durchführen, um unspezifische Bindungen auszuschließen.

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