Anti-BACE1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB und ELISA - P56817

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: BACE1-Funktion und -Lokalisierung

• BACE1 (Beta-Sekretase 1), auch bekannt als ASP2 oder Memapsin-2, ist eine Typ-I-Transmembran-Aspartylprotease, die zur Peptidase-A1-Familie gehört und vom BACE1-Gen auf Chromosom 11 kodiert wird.
• BACE1 ist für die proteolytische Verarbeitung des Amyloid-Vorläuferproteins (APP) verantwortlich, indem es am N-Terminus der Aβ-Peptidsequenz spaltet, um beta-gespaltenes lösliches APP und ein C-terminales Fragment zu erzeugen, das anschließend von Gamma-Sekretase verarbeitet wird, um Amyloid-Beta-Peptide zu produzieren, die für die Pathologie der Alzheimer-Krankheit zentral sind.
  Verwandte Referenzen: PMID:10656250 PMID:10677483 PMID:20354142
• Neben APP spaltet BACE1 andere Substrate wie CHL1 (enger Homolog von L1), was auf breitere Rollen bei der neuronalen Entwicklung und Funktion hindeutet (Aufgrund von Ähnlichkeit).
• BACE1 lokalisiert sich in mehreren zellulären Membranen, einschließlich der Zelloberfläche, des Golgi-Apparats, des trans-Golgi-Netzwerks, des endoplasmatischen Retikulums, der Endosomen (früh, spät, rezyklierend), der Lysosomen und der Membran-Rafts und ist in neuronalen Fortsätzen wie Axonen und Dendriten angereichert.
• Das Enzym wird im Gehirn stark exprimiert, insbesondere in der Substantia nigra, dem Locus coeruleus und der Medulla oblongata, und zeigt auch eine hohe Expression in der Bauchspeicheldrüse.
• Posttranslationale Modifikationen von BACE1 umfassen Glykosylierung, Acetylierung, Palmitoylierung, Phosphorylierung und Disulfidbrückenbildung; es wird als inaktives Zymogen synthetisiert, das eine proteolytische Aktivierung erfordert.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und das Protein unterliegt Ubiquitinierung und anderen regulatorischen Modifikationen, wie in Proteomikstudien identifiziert wurde.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen für diesen Antikörper ist ein synthetisches Peptid, das der zytoplasmatischen Domäne (Aminosäuren 402-501) von humanem BACE1 entspricht, einer Region, die für BACE1 einzigartig ist und nicht mit BACE2 konserviert ist. Dieses Design kann dem BACE1-Isoform Spezifität verleihen.
• Für den Western Blot (WB) ist der Nachweis von volllängem BACE1 bei ca. 56 kDa zu erwarten. Verwenden Sie geeignete positive Kontrollen wie Gewebelysate des Gehirns oder Zelllinien, die für die Expression von BACE1 bekannt sind. Erwägen Sie die Validierung der Spezifität mit Knockout- oder Knockdown-Proben.
• Für ELISA-Anwendungen kann dieser Antikörper entweder als Capture- oder Detektionsreagenz bewertet werden. Eine Optimierung der Beschichtungsbedingungen und die Kombination mit passenden Antikörpern wird empfohlen.
• Angesichts der berichteten Kreuzreaktivität mit Mensch, Maus und Ratte ist dieser Antikörper für Studien über diese Spezies geeignet. Überprüfen Sie jedoch immer die Reaktivität in Ihrem spezifischen experimentellen System.
• Der Antikörper wird auf Eisbeuteln versendet, um die Stabilität zu gewährleisten; lagern Sie ihn nach Erhalt bei den empfohlenen Temperaturen.

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