Anti-B-Raf V600E polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P15056

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: B-Raf-Funktion und -Lokalisierung

• B-Raf ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die als zentraler Transducer des RAS-RAF-MEK-ERK-mitogenen Signalwegs fungiert, indem sie MAP2K1/MEK1 phosphoryliert (PubMed:21441910, PubMed:29433126).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:21441910, PMID:29433126
• Sie phosphoryliert auch PFKFB2 und integriert so Wachstumsfaktorsignale mit dem zellulären Glukosestoffwechsel (PubMed:36402789).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:36402789
• B-Raf könnte zur synaptischen Plastizität beitragen, wie durch seine Rolle bei postsynaptischen Antworten von Hippocampusneuronen nahegelegt wird (PubMed:1508179).
  Verwandte Referenzen:
  PMID:1508179
• Die V600E-Mutation (ein Austausch von Valin gegen Glutamat an Position 600) innerhalb der Kinasedomäne führt zu konstitutiver Kinaseaktivität und ist ein häufiger Treiber bei Melanomen sowie kolorektalen und Schilddrüsenkrebsen.
• B-Raf lokalisiert im Zellkern, Zytoplasma und an der Zellmembran, was mit seiner Rolle bei der Übertragung extrazellulärer Signale auf intrazelluläre Effektoren übereinstimmt.
• Das Protein wird hauptsächlich im Gehirn und in den Hoden exprimiert und unterliegt regulatorischen Modifikationen wie Acetylierung, Methylierung und Ubiquitinierung.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 507–606 abdeckt und die V600E-Mutationsstelle einschließt; dieses Design kann Spezifität für die Mutante gegenüber Wildtyp-B-Raf verleihen.
• Für den Western Blot verwenden Sie ein Standard-SDS-PAGE-Gel, das für ein ~84 kDa Protein optimiert ist, und validieren Sie den Nachweis mit Lysaten von Zellen, die entweder Wildtyp- oder V600E-B-Raf exprimieren.
• Beim ELISA sollten Sie das immunisierende Peptid als positive Kontrolle einschließen, um die Bindungsspezifität zu bestätigen.
• Als polyklonaler Antikörper ist eine Charge-zu-Charge-Variabilität möglich; wir empfehlen, die Leistung jeder neuen Charge in Ihrem spezifischen Assaysystem zu bestätigen.

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