Anti-B-Raf polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - P15056

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: B-Raf-Funktion und Lokalisation

• B-Raf ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die durch das BRAF-Gen (auch bekannt als BRAF1, RAFB1) kodiert wird und Mitglied der RAF-Familie von Proto-Onkogenen ist. Es wird auch als Proto-Onkogen B-Raf, p94 oder v-Raf murine Sarkom viral oncogene homolog B1 bezeichnet.
• Als Schlüsselkomponente der RAS-RAF-MEK-ERK-Signaltransduktionskaskade überträgt B-Raf mitogene Signale von der Zellmembran zum Zellkern, indem es MAP2K1 (MEK1) phosphoryliert und aktiviert und so die Zellproliferation und das Überleben fördert. Verwandte Referenzen: PMID:21441910, PMID:29433126
• B-Raf phosphoryliert auch weitere Substrate wie PFKFB2, was es mit der Stoffwechselregulation verbindet. Verwandte Referenzen: PMID:36402789
• B-Raf wird hauptsächlich im Gehirn und in den Hoden exprimiert und könnte an postsynaptischen Reaktionen in hippocampalen Neuronen beteiligt sein. Verwandte Referenzen: PMID:1508179
• Subzellulär lokalisiert B-Raf im Zellkern, Zytoplasma und an der Zellmembran, was seiner Rolle in der Signaltransduktion entspricht.
• B-Raf durchläuft multiple posttranslationale Modifikationen, einschließlich Phosphorylierung, Acetylierung und Methylierung, und enthält eine Zinkfinger-Domäne, die für seine Regulation und onkogene Aktivität entscheidend ist.
• Mutationen in BRAF sind mit verschiedenen Krankheiten assoziiert, wie z.B. Kardiomyopathien, Taubheit, ektodermaler Dysplasie und intellektueller Behinderung, was seine breite physiologische Bedeutung unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, der gegen ein rekombinantes Fragment (aa 153-313) erzeugt wurde, kann dieses Produkt mehrere Epitope und Splice-Varianten von B-Raf erkennen und bietet somit eine hohe Sensitivität.
• Geeignete Anwendungen umfassen Western Blotting (WB) und ELISA unter Standardbedingungen; optimale Arbeitsverdünnungen sollten empirisch ermittelt werden.
• Für WB ist das erwartete Molekulargewicht etwa 84 kDa; erwägen Sie die Verwendung von Gehirn- oder Hoden-Gewebelysaten als positive Kontrollen aufgrund der hohen B-Raf-Expression.
• Bei der Verwendung von Maus- oder Rattenproben sollte die Kreuzreaktivität mit einem spezifischen Validierungsexperiment überprüft werden, da Kreuzreaktivität zwar angegeben ist, aber nicht für alle Anwendungen garantiert wird.
• Polyklonale Antikörper können Chargen-zu-Charge-Schwankungen aufweisen; wir empfehlen routinemäßige Validierungs- und Konsistenztests für kritische Assays.

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