Anti-AURKA Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA – O14965

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von AURKA

• AURKA ist eine mitotische Serin/Threonin-Kinase, die essenziell für den Zellzyklusfortschritt, die Zentrosomenreifung und die Spindelbildung ist (PubMed:11039908, PubMed:12390251, PubMed:17125279, PubMed:14523000, PubMed:26246606). Zugehörige Referenzen: PMID:11039908, PMID:12390251, PMID:17125279, PMID:14523000, PMID:26246606
• Es lokalisiert an Zentrosomen, Spindelpolen und Basalkörperchen und wird für die korrekte Chromosomenausrichtung und Zytokinese benötigt (PubMed:14523000, PubMed:26246606). Zugehörige Referenzen: PMID:14523000, PMID:26246606
• AURKA phosphoryliert zahlreiche Substrate darunter BORA, CDC25B, PLK1 und TPX2 und koordiniert dadurch den Eintritt in die Mitose und deren Ablauf (PubMed:11551964, PubMed:14702041, PubMed:15128871). Zugehörige Referenzen: PMID:11551964, PMID:14702041, PMID:15128871
• Die Kinase reguliert die Mikrotubulusdynamik durch Phosphorylierung von TACC3 und HDAC6 und beeinflusst dadurch die Spindelstabilität und die Disassemblierung von Zilien (PubMed:14702041, PubMed:17604723, PubMed:20643351). Zugehörige Referenzen: PMID:14702041, PMID:17604723, PMID:20643351
• Es hemmt den Tumorsuppressor p53/TP53 durch Phosphorylierung, fördert die onkogene Transformation und wird häufig in Krebszellen überexprimiert (PubMed:14702041). Zugehörige Referenzen: PMID:14702041
• AURKA wird in Hoden stark exprimiert und schwach in Skelettmuskel, Thymus und Milz; zudem wird es in Dickdarm-, Ovarial-, Prostatakrebs, Neuroblastom, Brust- und Gebärmutterhalstumor-Zelllinien stark exprimiert.
• Die Aktivität von AURKA wird durch Ubiquitinierung und die Interaktion mit wichtigen mitotischen Regulatoren wie TPX2 und der Proteinphosphatase 1 reguliert (PubMed:11551964). Zugehörige Referenzen: PMID:11551964

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aminosäuren 1-130) von menschlicher AURKA; diese Region ist einzigartig und kann die Kreuzreaktivität mit anderen Aurora-Kinasen minimieren, dennoch wird eine Validierung im jeweiligen Modellsystem empfohlen.
• Für die Western Blot-Analyse wird eine Bande in der Nähe von 46 kDa erwartet; verwenden Sie HeLa- oder einen anderen Krebszelllysat als Positivkontrolle und bestimmen Sie die optimale Antikörperverdünnung empirisch.
• Bei ELISA beschichten Sie Platten mit rekombinantem AURKA-Protein und titrieren Sie den Antikörper; die Paarung mit einem validierten Detektionsantikörper erfordert eine individuelle Optimierung.
• Zur Bestätigung der Spezifität kann ein siRNA-vermittelter Knockdown von AURKA oder eine Voradsorption mit Immunogen verwendet werden; diese Kontrollen sind für veröffentlichte Forschung unerlässlich.

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