Anti-ATRX-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für IF-P und ELISA – P46100

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ATRX

• ATRX (Alpha-Thalassämie/geistige Retardierung, X-chromosomal) ist ein Chromatin-Remodeller und Transkriptionsregulator, auch bekannt als X-chromosomales Kernprotein (XNP) oder RAD54L.
• Die Kernfunktion umfasst eine ATP-abhängige DNA-Translokase-Aktivität, die die Replikations-unabhängige Ablagerung von Histon H3.3 an perizentrischen Repeats und Telomeren sowie die Umgestaltung von G4-DNA-Strukturen ermöglicht.
• Es gehört zur SNF2/RAD54-Helikasefamilie und enthält eine N-terminal gelegene ATRX-DNMT3-DNMT3L-(ADD-)Domäne, eine C-terminal gelegene Helikasedomäne sowie ein Znf-HX-Zinkfingermotiv.
• Die subzelluläre Lokalisation befindet sich hauptsächlich im Zellkern, mit Anreicherung an den Telomeren und in PML-Kernkörperchen.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitinierung; Proteomikstudien deuten außerdem auf Methylierung und SUMOylierung (Isopeptidbindung) hin.
• Berichte über seine Beteiligung an der TERRA-Regulation sind widersprüchlich; in Fibroblasten reicht es weder aus, die Chromatinkondensation an den Telomeren zu verringern, noch die Expression telomerischer RNA zu erhöhen (PubMed:24500201). Zugehörige Referenzen: PMID:24500201
• ATRX bildet einen Komplex mit ZNF274, TRIM28 und SETDB1, um H3K9me3 an den 3′-Exons von Zinkfinger-Genen aufrechtzuerhalten, und verbindet dadurch epigenetische Stilllegung mit Chromatin-Remodelling (PubMed:27029610). Zugehörige Referenzen: PMID:27029610
• Es wird ubiquitär exprimiert und ist an verschiedenen Prozessen beteiligt, darunter die Reparatur von DNA-Schäden, die Aufrechterhaltung der Telomere über ALT sowie die allelspezifische Genregulation an geprägten Loci.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 2273–2413, einer Region nahe dem C-Terminus; stellen Sie sicher, dass der Antikörper bei Verwendung im denaturierenden Western Blot die erwartete Bande von etwa 283 kDa erkennt, obwohl nur IF-P und ELISA angegeben sind.
• Verwenden Sie für die Immunfluoreszenz (IF-P) eine geeignete Fixierung (z. B. 4 % PFA) und Permeabilisierung (0,1–0,5 % Triton X-100), um nukleäre Antigene zugänglich zu machen; schließen Sie eine Negativkontrolle ohne Primärantikörper ein.
• Titrieren Sie den Antikörper im ELISA, um das Signal-Rausch-Verhältnis zu optimieren; erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem ATRX-Protein oder Zelllysaten aus ATRX-exprimierenden Zelllinien als Beschichtungsantigene.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus ist angegeben; validieren Sie die Leistung in Mausgeweben/-zellen, falls dies für Ihr experimentelles System erforderlich ist.

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