Anti-ATP6V1E1-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P36543

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: ATP6V1E1-Funktion und -Lokalisierung

• ATP6V1E1 kodiert die V-Typ-Protonen-ATPase-Untereinheit E 1, auch bekannt als V-ATPase-31-kDa-Untereinheit (p31), Vakuoläre Protonenpumpen-Untereinheit E 1 und ATP6E/ATP6E2. Alternatives Spleißen kann mehrere Isoformen erzeugen.
• Als Untereinheit des peripheren V1-Komplexes der V-ATPase beteiligt sie sich an der ATP-Hydrolyse, um den Protonentransport über Membranen anzutreiben und dadurch intrazelluläre Kompartimente wie Lysosomen, Endosomen und sekretorische Vesikel zu ansäuern (PubMed:32001091, PubMed:33065002). Verwandte Referenzen: PMID:32001091 PMID:33065002
• V-ATPase lokalisiert sich auch bei bestimmten Zelltypen an der Plasmamembran und trägt zur extrazellulären Ansäuerung und pH-Regulierung bei (PubMed:32001091). Verwandte Referenzen: PMID:32001091
• Der V-ATPase-Komplex wirkt als mTORC1-Aktivator auf Lysosomenmembranen, indem er die Guanin-Nukleotid-Austauschfaktor-(GEF)-Aktivität des Ragulator-Komplexes erleichtert, wodurch die Rekrutierung von mTORC1 und anabole Signale gefördert werden (PubMed:22053050, PubMed:39695235). Verwandte Referenzen: PMID:22053050 PMID:39695235
• Subzellulär wird ATP6V1E1 auf der apikalen Zellmembran, den Membranen zytoplasmatischer Vesikel (synaptische Vesikel, clathrin-beschichtete Vesikel) und der Lysosomenmembran gefunden.
• Das Protein ist ubiquitär exprimiert, mit hohen Spiegeln in der Niere (insbesondere distales Nephron), der Haut und einem weit verbreiteten Nachweis in Geweben (PubMed:29993276, PubMed:12036578, PubMed:28065471). Verwandte Referenzen: PMID:29993276 PMID:12036578 PMID:28065471
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, wie durch Proteomik-Studien angezeigt, was ihre Assembly oder Aktivität regulieren könnte.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 77-226 von menschlichem ATP6V1E1, einem Bereich, der über Spezies hinweg gut konserviert ist, was die beobachtete Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte unterstützt.
• Für den Western Blot wird eine Bande von ca. 26 kDa erwartet. Verwenden Sie geeignete positive Kontrollen wie HeLa- oder Nierengewebe-Lysate und ziehen Sie die Einbeziehung einer negativen Kontrolle in Betracht.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC sollte der Antikörper V-ATPase in vesikulären Strukturen und möglicherweise an der Plasmamembran erkennen. Eine Optimierung der Permeabilisierungs- und Fixierungsbedingungen wird für jeden Zelltyp empfohlen.
• ELISA-Anwendungen können das rekombinante Immunogen oder Peptidfragmente als Beschichtungsantigene nutzen; eine Vorvalidierung des Antikörpers im gewählten Assay-Format wird empfohlen.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann er mehrere Isoformen erkennen, die durch alternatives Spleißen entstehen; diese Eigenschaft kann vorteilhaft für die Bestimmung der Gesamt-ATP6V1E1-Spiegel sein.
• Obwohl eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte vom Anbieter angegeben ist, wird eine individuelle Validierung in Ihrem spezifischen Probenempfängersystem aufgrund potenzieller speziesabhängiger Variationen in der Antigenzugänglichkeit empfohlen.

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