Anti-ATP6V0C-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA – P27449

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ATP6V0C

• ATP6V0C kodiert die 16-kDa-Proteolipid-Untereinheit c der Protonen-ATPase vom V-Typ, auch bekannt als 16-kDa-Proteolipid-Untereinheit c der vakuolären Protonenpumpe; zu den Aliasen gehören ATPL, VATL, VPPC, Vma3, ATP6C und ATP6L.
• Fungiert als protonenleitende, porenbildende Untereinheit des V0-Komplexes der vakuolären H(+)-ATPase (V-ATPase), eines aus mehreren Untereinheiten bestehenden Enzyms, das für die Ansäuerung intrazellulärer Kompartimente verantwortlich ist.
  Verwandte Referenzen: PMID:33065002, PMID:36074901
• In einigen Zelltypen wird die V-ATPase zur Plasmamembran transportiert, wo sie die Ansäuerung der extrazellulären Umgebung fördert (nach Ähnlichkeit).
• Der V-ATPase-Komplex wirkt außerdem als Aktivator von mTORC1 an der lysosomalen Membran, indem er den Guaninnukleotid-Austauschfaktor (GEF) des Ragulator-Komplexes unterstützt und dadurch die Rekrutierung von mTORC1 ermöglicht.
  Verwandte Referenzen: PMID:22053050
• Auf subzellulärer Ebene lokalisiert sich das Protein an den Membranen von clathrinbeschichteten Vesikeln, sekretorischen Vesikeln (z. B. synaptischen Vesikeln) und Lysosomen.
• Das Protein enthält vier Transmembranhelices und unterliegt einer Ubiquitin-Konjugation. Es ist an der Interaktion zwischen Wirt und Virus beteiligt, und Mutationen im Gen werden mit Epilepsie in Verbindung gebracht.
• Das berechnete Molekulargewicht des unverarbeiteten Vorläufers beträgt ungefähr 15,7 kDa und stimmt mit der beobachteten Bande bei etwa 16 kDa in Western Blots überein.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Der Antikörper wurde gegen ein synthetisches Peptid erzeugt, das die Aminosäuren 1–100 des menschlichen ATP6V0C umfasst. Für Western Blot wird in Lysaten aus menschlichen, Maus- oder Rattenzellen bzw. -geweben eine Bande nahe 16 kDa erwartet.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) wird eine Färbung von zytoplasmatischen Vesikeln und Lysosomen erwartet. Für den Zugang zu intrazellulären Epitopen ist eine Permeabilisierung erforderlich; das Protokoll sollte für vesikuläre Kompartimente optimiert werden.
• Für ELISA kann der Antikörper zum Nachweis des immunogenen Peptids oder eines rekombinanten Proteins verwendet werden. Die Assay-Bedingungen sollten im jeweiligen experimentellen System validiert werden.
• Als polyklonaler Antikörper kann es zu Chargen-zu-Chargen-Variabilität kommen. Es wird empfohlen, den Antikörper für jede neue Anwendung zu titrieren.

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