Anti-ATP6V0A1 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q93050

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: ATP6V0A1 Funktion und Lokalisation

• ATP6V0A1 codiert die 116 kDa-Untereinheit a1 der V0-Domäne der vakuolären H+-ATPase (V-ATPase), einem Multiteinheit-Enzym, das Protonen durch Zellmembranen pumpt. Verwandte Referenzen: PMID:33065002, PMID:33833240, PMID:34909687

• Diese Untereinheit ist essenziell für den Protonentransport in Organellen wie Lysosomen, Endosomen, das trans-Golgi-Netzwerk und synaptische Vesikel, hält einen sauren luminalen pH-Wert für Proteinabbau, Rezeptor-Trafficking und Neurotransmitter-Beladung aufrecht.

• Die V-ATPase wirkt als Aktivator für mTORC1 an Lysosomenmembranen, indem sie die Guaninnukleotid-Austauschfaktor (GEF)-Aktivität des Ragulator-Komplexes fördert und mTORC1 an die Lysosomenoberfläche rekrutiert. Verwandte Referenzen: PMID:22053050

• In Neuronen ist ATP6V0A1 kritisch für neuronale Entwicklung und Konnektivität; Verlustfunktionsmutationen sind mit entwicklungsbedingter und epileptischer Enzephalopathie und geistiger Behinderung verbunden. Verwandte Referenzen: PMID:33833240

• Das Protein lokalisiert an der Membran von Clathrin-beschichteten Vesikeln, synaptischen Vesikeln und Melanosomen und kann in spezialisierten Zellen auch zur Plasmamembran exportiert werden, um die extrazelluläre Umgebung zu azidifizieren.

• ATP6V0A1 unterliegt alternatives Spleißen und enthält mehrere N-Glykosylierungs- und Phosphorylierungsstellen, die seine Stabilität und Funktion regulieren können.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Da das Immunogen einer zytoplasmatischen Region (AS 60-300) entspricht, kann dieser polyclonale Antikörper sowohl natives als auch denaturiertes ATP6V0A1 im Western Blot (WB) effektiv nachweisen. Eine Bande nahe der vorhergesagten 96 kDa kann beobachtet werden; zusätzliche Banden durch posttranslationale Modifikationen oder Isoformen sind möglich.

• Für Immunfluoreszenz (IF/ICC) kann der Antikörper ATP6V0A1 an intrazellulären vesikulären Kompartimenten wie Endosomen und Lysosomen sichtbar machen. Co-Färbung mit Organellenmarkern kann die Lokalisation bestätigen.

• Für ELISA ist der direkte oder indirekte Nachweis von rekombinanten oder gereinigten ATP6V0A1-Protein Fragmenten möglich. Titrieren Sie den Antikörper und verwenden Sie geeignete Blockierungspuffer, um das Signal-Rausch-Verhältnis zu optimieren.

• Validieren Sie die Spezifität des Antikörpers, indem Sie positive Kontrolllysate (z. B. HeLa, U2OS) und eine Negativkontrolle (Knockout- oder siRNA-behandelte Zellen) in Ihren Experimenten einschließen.

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