Anti-ATP5C1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P36542

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ATP5C1

• ATP5C1 (ATP-Synthase F1-Untereinheit Gamma) ist eine kritische Untereinheit der mitochondrialen F1F0-ATP-Synthase (Komplex V), dem Enzym, das für die Synthese von ATP aus ADP und anorganischem Phosphat unter Nutzung der Protonengradienten über die innere Mitochondrienmembran verantwortlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:37244256
• Dieses Protein existiert in zwei Hauptisoformen: Herz-Isoform, überwiegend in Herz- und Skelettmuskel exprimiert, und Leber-Isoform, exprimiert in Gehirn, Leber, Niere, Haut, Darm, Magen und Aorta, was gewebespezifische Energieanforderungen widerspiegelt.
• Als Gamma-Untereinheit der Zentralstange koppelt ATP5C1 die protonenflussgetriebene Rotation in der F0-Membrandomäne an Konformationsänderungen im katalytischen F1-Kopf und ermöglicht so die ATP-Synthese. Es spielt auch eine unverzichtbare Rolle bei der Assemblierung des katalytischen F1-Kerns, was durch seine Anforderung für die Bildung eines wichtigen F1-Assemblierungszwischenprodukts belegt wird. Verwandte Referenzen: PMID:29499186
• ATP5C1 ist an der inneren mitochondrialen Membran lokalisiert und enthält ein N-terminales Transitpeptid, das seinen Import in die Mitochondrien steuert. Es unterliegt posttranslationalen Modifikationen einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung, die seine Aktivität oder Assemblierung regulieren können.
• Die vorhergesagte Molekülmasse von ATP5C1 beträgt ungefähr 33 kDa (32996 Da basierend auf UniProt), was mit der beobachteten Bande im Western Blot übereinstimmt.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das zur Erzeugung dieses Antikörpers verwendete Immunogen entspricht den Aminosäuren 26-298 von menschlichem ATP5C1 (NP_001001973.1), das den Großteil des reifen Proteins nach Spaltung des mitochondrialen Transitpeptids abdeckt; daher wird erwartet, dass der Antikörper die endogene reife Form (ungefähr 33 kDa) im Western Blot erkennt.
• Für Western Blot (WB)-Anwendungen sollten Sie mitochondrial angereicherte Proteinlysate aus Zelllinien oder Geweben (wie Herz, Skelettmuskel oder Leber) verwenden, die ATP5C1 exprimieren, und geeignete Molekulargewichtsmarker einschließen, um die 33 kDa-Bande zu bestätigen.
• Bei der Anwendung dieses Antikörpers in der Immunhistochemie (IHC) oder Immunfluoreszenz (IF) kann ein starkes Signal in Geweben mit hohem Mitochondriengehalt wie Herz und Skelettmuskel beobachtet werden; eine Co-Färbung mit mitochondrialen Markern kann helfen, die Lokalisation zu bestätigen.
• Es wird berichtet, dass der Antikörper mit menschlichem, Maus- und Ratten-ATP5C1 reagiert; aufgrund potenzieller Sequenzunterschiede zwischen den Spezies ist es jedoch ratsam, die Kreuzreaktivität im relevanten Probensystem vor großangelegten Experimenten zu validieren.
• Für ELISA- und IF/ICC-Anwendungen wird empfohlen, eine Titration durchzuführen, um die optimale Arbeitsverdünnung für die spezifische Probenart und experimentelle Bedingungen zu bestimmen.

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