Anti-ATP1A4 polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q13733

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ATP1A4-Funktion und Lokalisierung

• ATP1A4 kodiert die spermenspezifische alpha-4-katalytische Untereinheit der Na+/K+-ATPase, eine transmembranäre Ionenpumpe, die die ATP-Hydrolyse mit dem Austausch von 3 Na+ aus der Zelle und 2 K+ in die Zelle koppelt. Verwandte Referenzen: PMID:16861705
• Diese ATP1A4-Isoform ist für die Spermienmotilität, Kapazitation und männliche Fruchtbarkeit essentiell, indem sie die für die Flagellenfunktion und zelluläre Signalgebung erforderlichen Ionenkonzentrationsgradienten aufrechterhält (By similarity).
• Das Protein ist ein integraler Bestandteil der Zellmembran, was mit seiner Rolle als P-Typ-ATPase-Transporter übereinstimmt, und enthält mindestens eine Transmembranhelix und eine ATP-Bindungsdomäne (Keywords).
• Die ATP1A4-Expression ist stark auf den Hoden beschränkt, wobei das Protein in hohen Mengen in reifen Spermien nachgewiesen wird und nur Spuren von mRNA im Skelettmuskel gefunden werden. Verwandte Referenzen: PMID:16175638, PMID:16861705
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, und das Protein benötigt Mg2+ für seine enzymatische Aktivität, die Bindung von ATP und den transportierten Kationen Na+ und K+ (Keywords).
• Alternatives Spleißen von ATP1A4 erzeugt mehrere Isoformen, die einer gewebespezifischen oder entwicklungsbedingten Regulation unterliegen können (Keywords).
• Das ATP1A4-Gen gehört zur ATP1A-Familie der Natrium/Kalium-ATPase-Alpha-Untereinheiten, zu der auch ubiquitär exprimierte Formen wie ATP1A1 gehören.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N‑terminalen Region (Aminosäuren 1‑90) von humanem ATP1A4, was darauf hindeutet, dass der Antikörper möglicherweise bevorzugt den N‑Terminus des Voll‑Längen‑Proteins erkennt; berücksichtigen Sie dies bei der Planung von Epitop-Blockierungs- oder Kompetitionsassays.
• Für Western Blotting ist in Proben aus Hoden oder reifen Spermien eine Bande bei etwa 114 kDa zu erwarten; validieren Sie den Antikörper im relevanten Proben­system (z. B. Human-, Maus- oder Rattenhodenlysaten) aufgrund der berichteten Kreuzreaktivität.
• Bei der Verwendung von ELISA kann der Antikörper für die Antigenbindung oder -detektion eingesetzt werden; führen Sie Standard-Checkerboard-Titrationen durch, um die optimalen Arbeitskonzentrationen für Ihr spezifisches Assay-Format zu bestimmen.
• Angesichts der eingeschränkten Expression von ATP1A4 sollten Sie sicherstellen, dass Negativkontrollproben (z. B. Nicht-Hodengewebe oder Zelllinien) eingeschlossen werden, um die Spezifität zu bestätigen.
• Der Antikörper wird als polyklonaler Kaninchenantikörper geliefert, der von Charge zu Charge variieren kann; es ist ratsam, eine Referenzcharge für langfristige Reproduzierbarkeitsstudien zurückzulegen.

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