Anti-ATM Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q13315

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ATM

• ATM, oder Ataxia telangiectasia mutated, ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die als DNA-Schadenssensor wirkt. Sie erkennt Doppelstrangbrüche (DSB) und aktiviert Checkpoint-Signalgebung als Reaktion auf genotoxische Belastungen wie ionisierende Strahlung und ultraviolette A-Strahlung (PubMed:10550055, PubMed:10839545, PubMed:10910365). Zugehörige Referenzen: PMID:10550055 PMID:10839545 PMID:10910365
• Die Kinase phosphoryliert nachgeschaltete Effektoren mit dem Konsensusmotiv [ST]-Q, einschließlich Histon H2AX an Ser-139, p53/TP53, CHEK2, BRCA1, MRE11 und viele andere, wodurch sie DNA-Reparatur, Zellzyklusarrest und Apoptose koordiniert (PubMed:10550055, PubMed:10766245, PubMed:10802669). Zugehörige Referenzen: PMID:10550055 PMID:10766245 PMID:10802669
• ATM spielt eine Schlüsselrolle bei der Zellzykluskontrolle und gilt als Tumorsuppressor. Mutationen im ATM-Gen sind mit Ataxie-Teleangiektasie verbunden, einem Syndrom mit Neurodegeneration, Immunschwäche und erhöhter Krebsdisposition.
• Subzellulär ist ATM hauptsächlich im Kern lokalisiert, kommt aber auch in zytoplasmatischen Vesikeln, dem Zentrosom und Peroxisomen vor. Als Reaktion auf reaktive Sauerstoffspezies (ROS) transloziert es zu Peroxisomen und phosphoryliert PEX5, um die Pexophagie zu induzieren (PubMed:26344566). Zugehörige Referenzen: PMID:26344566
• ATM wird in einer Vielzahl von Geweben exprimiert, einschließlich Pankreas, Niere, Skelettmuskel, Leber, Lunge, Plazenta, Gehirn, Herz, Milz, Thymus, Hoden, Ovar, Dünndarm, Dickdarm und Leukozyten.
• Das Protein wird nach DNA-Schädigung an mehreren Resten phosphoryliert – dies ist essenziell für seine Aktivierung und die anschließende Targetierung von Substraten.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 2320–2566 im C-terminalen Bereich von ATM. Dieser Antikörper erkennt voraussichtlich das Volllängenprotein (351 kDa) und kann mit Isoformen reagieren, die dieses Epitop enthalten; validieren Sie die Reaktivität in Ihrem relevanten Probensystem.
• Verwenden Sie für das Western Blotting einen passenden Gelprozentsatz und Transferbedingungen (z. B. NassTransfer mit verlängerter Dauer), um dieses hochmolekulare Protein effizient zu blotieren.
• Optimieren Sie bei Immunfluoreszenz/Immuncytochemie Fixierung und Permeabilisierung, um ATM in nukleären und zytoplasmatischen Kompartimenten nachzuweisen; erwägen Sie die Anwendung bekannter DNA-schädigender Behandlungen, um Lokalisationsänderungen zu beurteilen.
• Verwenden Sie für ELISA einen zuverlässigen Beschichtungspuffer und validieren Sie die Kompatibilität des Antikörperpaars, wenn Sie es in einem Sandwich-Assay einsetzen.

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