Anti-ATM Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q13315

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ATM-Funktion und Lokalisierung

• Serin/Threonin-Proteinkinase, die bei DNA-Doppelstrangbrüchen (DSBs), Apoptose und genotoxischem Stress die Checkpoint-Signalgebung aktiviert und als kritischer DNA-Schadenssensor fungiert. Verwandte Referenzen: PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365

• Erkennt die Substrat-Konsensussequenz [ST]-Q und phosphoryliert Schlüsselproteine der DNA-Schadensantwort, einschließlich CHEK2, p53/TP53, BRCA1 und Nibrin (NBN). Verwandte Referenzen: PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365, PMID:10766245, PMID:10802669

• Phosphoryliert die Histonvariante H2AX an Ser-139 an Doppelstrangbrüchen und reguliert so den DNA-Schadensantwortmechanismus (By similarity).

• Phosphoryliert verschiedene Substrate, darunter DYRK2, ATF2, ERCC6, TTC5/STRAP und PEX5, um DNA-Reparatur, Apoptose und zelluläre Homöostase zu koordinieren. Verwandte Referenzen: PMID:19965871, PMID:15916964, PMID:29203878, PMID:15448695, PMID:26344566

• Befindet sich im Zellkern, in zytoplasmatischen Vesikeln, Zentrosomen und der Peroxisomen-Matrix, was mit seinen Rollen in der DNA-Schadenssignalgebung, im Transport und in der Pexophagie übereinstimmt.

• Ubiquitär exprimiert, mit höchsten Konzentrationen in Pankreas, Niere, Skelettmuskel, Leber, Lunge, Plazenta, Gehirn, Herz, Milz, Thymus, Hoden, Eierstock, Dünndarm, Dickdarm und Leukozyten.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für die Western-Blot-Analyse ist eine Bande bei etwa 351 kDa zu erwarten. Aufgrund der großen Proteingröße sollten Sie Niedrigprozent-Gradientengele, verlängerte Nass-Transferzeiten in Betracht ziehen und die Transfereffizienz mit einem vorgefärbten Hochmolekulargewichtsmarker überprüfen.
• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der C-terminalen Region (aa 1900–2000). Die Epitopzugänglichkeit kann durch die Proteinkonformation beeinflusst werden; denaturierende und reduzierende Bedingungen werden empfohlen.
• Als polyklonaler Antikörper kann er Chargen-zu-Charge-Variabilität aufweisen. Validieren Sie jede neue Charge an einer bekannten Positivkontrolle (z. B. humanem Zelllysat, das ATM exprimiert), bevor Sie sie verwenden.
• Für ELISA optimieren Sie die Konzentration des Beschichtungsantigens und die Detektionsbedingungen. Es wird erwartet, dass der Antikörper humanes ATM erkennt; die Kreuzreaktivität mit anderen Spezies wurde nicht getestet.
• Um die Spezifität zu bestätigen, ziehen Sie die Verwendung von ATM-depletierten Proben (z. B. siRNA-Knockdown) oder eines kompetitiven Peptids in Ihrem Assaysystem in Betracht.

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