Anti-ATM monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – Q13315

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: ATM Funktion und Lokalisation

• ATM (Ataxia telangiectasia mutated) ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, die vom ATM-Gen kodiert wird und zur PIKK-Familie der Kinasen gehört, die an der DNA-Schadenssignalübertragung beteiligt sind.
• Funktioniert als primärer Sensor von DNA-Doppelstrangbrüchen (DSBs) und genotoxischem Stress wie ionisierender Strahlung und ultraviolettem A-Licht. Es erkennt und phosphoryliert Substratproteine am Konsensusmotiv [ST]-Q, um Checkpoint-Signalgebung, Apoptose und DNA-Reparatur zu initiieren. Zugehörige Referenzen: PMID:10550055, PMID:10839545, PMID:10910365
• Phosphoryliert zahlreiche nachgeschaltete Effektoren, darunter Histon H2AX (an Ser-139), CHEK2, p53/TP53, BRCA1 und FANCD2, und koordiniert dadurch Zellzyklusarrest und DNA-Schadensreparaturwege. Zugehörige Referenzen: PMID:10550055, PMID:10766245, PMID:10802669
• Lokalisiert im Zellkern, wo es hauptsächlich die DNA-Schadenssignalgebung vermittelt, kommt aber auch in zytoplasmatischen Vesikeln, Zentrosomen und Peroxisomen vor, was seine vielfältigen zellulären Funktionen widerspiegelt.
• Wird in menschlichen Geweben weitverbreitet exprimiert, mit Nachweis in Bauchspeicheldrüse, Niere, Skelettmuskel, Leber, Lunge, Plazenta, Gehirn, Herz, Milz, Thymus, Hoden, Eierstock, Dünndarm, Dickdarm und Leukozyten.
• Reguliert die Pexophagie durch Phosphorylierung von PEX5 an Peroxisomen als Reaktion auf reaktive Sauerstoffspezies und targetiert es für Ubiquitinierung und Degradation. Zugehörige Referenzen: PMID:26344566
• Weitere Funktionen umfassen die Durchsetzung der Allelexklusion während der B-Zellentwicklung, die Kontrolle des replikationsabhängigen Histon-mRNA-Abbaus und die Wirkung als potenzieller Tumorsuppressor.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 2619–2939 des menschlichen ATM, das im C-terminalen Bereich lokalisiert ist. Validieren Sie die Antikörperspezifität mit geeigneten Kontrollen, insbesondere bei der Untersuchung von Isoformen oder Spleißvarianten.
• Für Western Blot wandert ATM bei etwa 351 kDa. Verwenden Sie Polyacrylamidgele mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6–8%) und verlängerte Transferzeiten, um einen effizienten Transfer dieses großen Proteins zu gewährleisten.
• Bei IHC-P optimieren Sie Antigen-Retrieval-Methoden (z. B. hitzeinduzierte Epitop-Retrieval) und die Konzentration des Primärantikörpers. Verwenden Sie als Positivkontrollen Gewebe mit hoher ATM-Expression wie Hoden oder Bauchspeicheldrüse.
• Kreuzreaktivität mit Maus ist nachgewiesen; bei Verwendung von Mausmodellen bestätigen Sie die Eignung durch Tests in relevanten Knockout- oder Knockdown-Systemen.
• Als monoklonaler Antikörper bietet er hohe Spezifität. Fügen Sie sowohl positive als auch negative biologische Kontrollen hinzu (z. B. ATM-profiziente und ATM-defiziente Zelllinien), um die Identität der Bande zu bestätigen.

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