Anti-ATG5 Kaninchen Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – Q9H1Y0

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von ATG5

• ATG5 ist ein zentrales Autophagie-Protein, das mit ATG12 konjugiert, um einen E3-ähnlichen Enzymkomplex zu bilden. Dieser ist essenziell für die Lipidierung der ATG8-Familie und die Bildung von Autophagomen.
• Neben der Autophagie ist ATG5 an der mitochondrialen Qualitätskontrolle, der Entwicklung und dem Überleben von Lymphozyten, der MHC-Klasse-II-Antigenpräsentation, der Axonerhaltung, der Adipozytendifferenzierung und der primären Ziliogenese beteiligt.
• ATG5 lokalisiert im Zytoplasma und an den Membranen präautophagiosomaler Strukturen, was mit seiner Rolle bei der Bildung autophagischer Vesicle übereinstimmt.
• Auf mRNA-Ebene ist es ubiquitär exprimiert, aber das Protein ist in apoptotischen Zellen dramatisch hochreguliert, wo es die caspaseabhängige Zellsterblichkeit vermittelt.
• Bei der Apoptose interagiert ATG5 mit FADD und wird für die IFN-gamma-induzierte autophagische Zellsterblichkeit benötigt.
• Bei viralen Infektionen kann ATG5 als proviraler Faktor wirken: Es wird für die Translation eintretender Hepatitis-C-Virus(HCV)-RNA benötigt und reguliert angeborene antivirale Immunantworten über den Typ-I-IFN-Weg negativ. Verwandte Referenzen: PMID:17709747 PMID:19666601
• ATG5 erfährt posttranslationale Modifikationen, einschließlich Acetylierung und der Bildung einer Isopeptidbindung während der Konjugation mit ATG12, was entscheidend für seine autophagische Funktion ist.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 28–275 des humanen ATG5, eine Region, die an der ATG12-Konjugation beteiligt ist; bestätigen Sie bei Bedarf, dass der Antikörper sowohl nicht konjugierte als auch konjugierte Formen erkennt.
• Bei Western Blot erwarten Sie eine Bande bei ca. 32 kDa in Lysaten von humanem, Maus- oder Rattengewebe; verwenden Sie passende positive und negative Kontrollen.
• Für IHC-P optimieren Sie die Antigengewinnung und Antikörperverdünnung für jeden Gewebetyp, da die ATG5-Expressionsniveaus zwischen Geweben und apoptotischen Bedingungen variieren können.
• ELISA-Anwendungen können sorgfältige Beschichtungsbedingungen erfordern; erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem ATG5-Protein als Standard.

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