Anti-ATG4D-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q86TL0

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: ATG4D-Funktion und Lokalisierung

• ATG4D ist eine Cysteinprotease (Autophagin-4), die zur ATG4-Familie gehört, zu der ATG4A, ATG4B und ATG4C gehören; sie vermittelt hauptsächlich die Delipidierung von Proteinen der ATG8-Familie.
• Funktioniert in der Autophagie durch proteolytische Aktivierung und Delipidierung von ATG8-Proteinen (MAP1LC3 und GABARAPL2); spaltet die C-terminale Aminosäure ab, um ein für die Konjugation mit Phosphatidylethanolamin (PE) und Membraneinbau notwendiges Glycin freizulegen. Verwandte Referenzen: PMID:21177865
• Vermittelt die Delipidierung von PE-konjugierten ATG8-Proteinen während der Makroautophagie und delipidiert auch ATG8-Proteine, die während der nicht-kanonischen Autophagie in endolysosomalen Kompartimenten mit Phosphatidylserin (PS) konjugiert sind. Verwandte Referenzen: PMID:29458288 PMID:33909989
• Spielt eine Rolle bei der Mitophagie durch Regulation des ATG9A-Transports zu den Mitochondrien und Förderung der Phagophor-ER-Kontakte unabhängig von seiner Proteaseaktivität. Verwandte Referenzen: PMID:33773106
• Verknüpft mitochondriale Dysfunktion mit Apoptose: Der mitochondriale Import von ATG4D während Stress reguliert die mitochondriale Physiologie, ROS, Mitophagie und die Zellviabilität.
• Lokalisiert im Zytoplasma und in der mitochondrialen Matrix.
• Post-translational durch Phosphorylierung reguliert; enthält alternative Spleißvarianten.
• Weit verbreitet exprimiert, mit der höchsten Expression im Hoden.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (aa 265-474) entspricht einem Bereich, der Spezifität für ATG4D gegenüber anderen ATG4-Familienmitgliedern verleihen kann; Verifizieren Sie die Spezifität mithilfe von positiven und negativen Kontrollen.
• Für Western Blot validieren Sie den Antikörper in menschlichen und Ratten-Zell- oder Gewebelysaten; eine Bande um 53 kDa wird erwartet. Erwägen Sie die Verwendung von reduzierenden Bedingungen.
• ELISA-Anwendungen können optimiert werden, indem dieser polyklonale Antikörper als Nachweisantikörper in einem Sandwich-ELISA-Format mit einem geeigneten Fangantikörper verwendet wird.
• Da ATG4D an der Autophagie und Apoptose beteiligt ist, können experimentelle Bedingungen (z. B. Hunger, mitochondrialer Stress) die Expressionsniveaus beeinflussen; Fügen Sie entsprechende Behandlungen hinzu.

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