Anti-ATG4B Poliklonale Antikörper für WB, ELISA – Q9Y4P1

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von ATG4B

• ATG4B, auch bekannt als Autophagin-1 oder APG4B, ist eine Cysteinprotease, die eine doppelte Rolle in der Autophagie spielt, indem sie die proteolytische Aktivierung und Delipidierung von Proteinen der ATG8-Familie vermittelt. Verwandte Referenzen: PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651

• Es wird für die kanonische Makroautophagie, nicht-kanonische Autophagie und Mitophagie benötigt, was seine zentrale Rolle in zellulären Abbauwegen unterstreicht. Verwandte Referenzen: PMID:33773106, PMID:33909989

• ATG4B spaltet spezifisch das C-terminale Aminosäurerest von ATG8-Proteinen (MAP1LC3A/B/C, GABARAP, GABARAPL1/2), um ein Glycinrest freizulegen, das für die Konjugation an Phosphatidylethanolamin (PE) und die Membraninsertion erforderlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:15169837, PMID:15187094, PMID:17347651

• Über die proteolytische Prozessierung hinaus wirkt ATG4B auch als deubiquitinierungsähnliches Enzym, um ATG8 von konjugierten Proteinen (ATG8ylierung) wie ATG3 zu entfernen, und katalysiert die Delipidierung von PE-konjugierten ATG8-Proteinen während der Autophagie. Verwandte Referenzen: PMID:31315929, PMID:33773106, PMID:15187094, PMID:19322194, PMID:28633005

• Unter den ATG4-Paralogen (ATG4A-D) ist ATG4B die Hauptisoform für die proteolytische Aktivierung von ATG8-Proteinen, weist aber im Vergleich zu anderen eine schwächere Delipidierungsaktivität auf. Verwandte Referenzen: PMID:29458288, PMID:30661429

• Bei der Mitophagie kann ATG4B das Wachstum des Phagophors unabhängig von seiner enzymatischen Aktivität und ATG8-Konjugation fördern, indem es den ATG9A-Transport reguliert und Kontakte zwischen dem Phagophor und dem Endoplasmatischen Retikulum erleichtert. Verwandte Referenzen: PMID:33773106

• ATG4B lokalisiert überwiegend im Zytoplasma, mit nachgewiesenen Assoziationen zu Autophagosomen, Endoplasmatischem Retikulum und Mitochondrien, was mit seinen Funktionen in der Autophagie und Mitophagie übereinstimmt.

• Posttranslationale Modifikationen von ATG4B umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und S-Nitrosylierung, die seine Aktivität und Stabilität regulieren können.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt die Aminosäuren 1–393 von humanem ATG4B ab; der resultierende Antikörper kann Volllängen-ATG4B und möglicherweise durch alternatives Spleißen erzeugte Isoformen erkennen. Validieren Sie die Spezifität in dem vorgesehenen Probentyp.
• Für das Western Blotting erwarten Sie eine Bande bei etwa 44 kDa unter reduzierenden Bedingungen. Aufgrund potenzieller posttranslationaler Modifikationen oder Spaltung können zusätzliche Banden auftreten; bestätigen Sie dies mit geeigneten Kontrollen.
• Die ATG4B-Expression ist ubiquitär, kann aber variieren; verwenden Sie erwägen Sie eine Positivkontrolle wie HeLa- oder HEK293-Zelllysate und überprüfen Sie bei Bedarf den Knockdown.
• Dieses Produkt ist für ELISA qualifiziert; optimieren Sie die Beschichtungskonzentration und die Detektionsbedingungen entsprechend dem Assayformat.

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