Anti-ATG4A Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q8WYN0

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ATG4A-Funktion und -Lokalisierung

• ATG4A ist eine für die Autophagie essentielle Cysteinprotease, die sowohl die proteolytische Aktivierung als auch die Delipidierung von ATG8-Familienproteinen vermittelt. Verwandte Referenzen: PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651

• Die Proteaseaktivität von ATG4A spaltet das C-terminale Rest von ATG8-Proteinen (einschließlich MAP1LC3A, GABARAP, GABARAPL2), um ein Glycin freizulegen, das für ihre Konjugation an PE und Membranzielung während der Autophagie erforderlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:12473658, PMID:15169837, PMID:17347651

• ATG4A katalysiert die Delipidierung von PE-konjugierten ATG8-Familienproteinen mit einer stärkeren Delipidierungsaktivität im Vergleich zu ATG4B und trägt so zum Recycling von ATG8-Proteinen bei. Verwandte Referenzen: PMID:29458288, PMID:33909989

• Es fungiert als deubiquitinierendes Enzym, um der ATG8ylierung entgegenzuwirken, indem es ATG8 von Konjugaten wie ATG3 spaltet. Verwandte Referenzen: PMID:31315929, PMID:33773106

• Unabhängig von seiner Proteaseaktivität reguliert ATG4A die Mitophagie durch Kontrolle des ATG9A-Transports zu den Mitochondrien und Erleichterung der Phagophor-Endoplasmatisches-Reticulum-Kontakte während des Lipidtransfers. Verwandte Referenzen: PMID:33773106

• ATG4A lokalisiert im Zytoplasma, was mit seiner Rolle bei der Autophagie übereinstimmt.

• Das ATG4A-Gen unterliegt einem alternativen Spleißen, produziert multiple Isoformen und wurde in Proteomik-Studien identifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 210–398 von humanem ATG4A, ein Bereich, der funktionell relevante Domänen enthalten kann; die Erhaltung des Epitops und die Artenhomologie sollten bei der Interpretation von Kreuzreaktivitätsdaten berücksichtigt werden.
• Für Western Blots unter reduzierenden Bedingungen wird eine Bande in der Nähe von 45 kDa erwartet; Verwenden Sie geeignete zelluläre oder Gewebelysate mit bestätigter ATG4A-Expression als positive Kontrolle.
• Bei der Immunfluoreszenz oder Immunzytochemie sollte die zytoplasmatische Lokalisierung von ATG4A nachweisbar sein; Optimieren Sie die Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle für den spezifischen Zelltyp.
• ELISA-Anwendungen können unter Verwendung von rekombinantem ATG4A-Protein oder Peptidfragmenten entwickelt werden; Die Assaybedingungen können eine empirische Optimierung erfordern.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Orthologen ist angegeben; Validieren Sie die Spezifität in der Zielspezies unter Verwendung von Knockout- oder Knockdown-Modellen, wo dies möglich ist.

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