Anti-ATG2A-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q2TAZ0

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ATG2A-Funktion und -Lokalisierung

• Autophagy-assoziiertes Protein 2-Homolog A (ATG2A), auch bekannt als BLTP4A, ist ein großes Lipidtransferprotein, das für die Bildung von Autophagosomen essentiell ist. Es verankert die Isolationsmembran (IM) am endoplasmatischen Retikulum (ER) und überträgt direkt Phospholipide vom ER zur IM, um die Membran auszudehnen. Verwandte Referenzen: PMID:28561066, PMID:30952800, PMID:31271352
• ATG2A bindet an die ER-Austrittsstelle (ERES) und extrahiert Phospholipide, die anschließend an ATG9 (ATG9A oder ATG9B) auf der expandierenden autophagosomalen Membran abgegeben werden. Seine Lipidtransferaktivität wird stark durch WIPI1 und WDR45/WIPI4 verstärkt, welche die Assoziation von ATG2A mit phosphatidylinositol-3-monophosphat (PI3P)-reichen Membranen fördern. Verwandte Referenzen: PMID:30952800, PMID:31271352
• Neben der Autophagy reguliert ATG2A die Morphologie und intrazelluläre Verteilung von Lipidtropfen, was es mit dem Lipidstoffwechsel und der Speicherung verbindet. Verwandte Referenzen: PMID:22219374, PMID:28561066
• Subzellulär lokalisiert ATG2A an der präautophagosomalen Strukturmembran, der ER-Membran und den Lipidtropfen, was seiner Rolle bei Membrankontaktstellen entspricht.
• Das Protein unterliegt der Phosphorylierung und alternativem Spleißen, wie durch seine Aufnahme in Phosphoproteom-Datensätze und mehrere Isoform-Vorhersagen angezeigt wird (UniProt-Schlüsselwörter: Phosphoprotein, Alternatives Spleißen).
• Mit einem Molekulargewicht von ca. 213 kDa ist ATG2A ein Mitglied der ATG2-Familie von Autophagy-Proteinen, die konservierte Mediatoren der Membranexpansion während der Autophagosomen-Biogenese sind.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das aus einem internen Bereich (aa 700–800) von humanem ATG2A abgeleitet ist, was darauf hindeutet, dass der Antikörper sowohl Volllängen- als auch trunkierte Isoformen, die diese Sequenz enthalten, erkennen kann.
• Im Western Blot wird ein ausgeprägtes Band in der Nähe von 213 kDa erwartet; aufgrund der großen Proteingröße sollten jedoch angemessene Transferbedingungen (z. B. Gele mit niedrigem Prozentsatz, verlängerte Blotting-Zeiten) sichergestellt und geeignete Molekulargewichtsmarker verwendet werden.
• ELISA kann für Titer-Tests und semi-quantitative Analysen verwendet werden; erwägen Sie die Kombination mit einem passenden Detektionsantikörper, der gegen ein nicht überlappendes Epitop gerichtet ist.
• Die Kreuzreaktivität ist nur für den Menschen annotiert; die Reaktivität mit anderen Spezies sollte bei Bedarf experimentell verifiziert werden.
• Die optimalen Arbeitsverdünnungen für sowohl WB als auch ELISA sollten empirisch unter Verwendung des relevanten biologischen Probensystems (z. B. menschliche Zelllinien, die bekanntermaßen ATG2A exprimieren) bestimmt werden.

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