Anti-ATG14 Poliklonale Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q6ZNE5

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von ATG14

• ATG14 (auch bekannt als Atg14L oder Barkor) ist ein zentraler Autophagie-Regulator, der sowohl für die basale als auch für die induzierbare Autophagie benötigt wird. Es fungiert als Teil der autophagiespezifischen PI3-Kinase-Komplexes PI3KC3-C1 und bestimmt dessen Lokalisierung. Verwandte Referenzen: PMID:18843052, PMID:19050071
• ATG14 fördert die Autophagosomenbildung und die Konjugation von MAP1LC3/LC3 an Phosphatidylethanolamin, ein kritischer Schritt bei der Verlängerung von Autophagosomen. Verwandte Referenzen: PMID:19270696, PMID:20713597
• ATG14 fördert die Translokation von BECN1 aus dem trans-Golgi-Netzwerk zu Autophagosomen. Verwandte Referenzen: PMID:20713597
• ATG14 verstärkt die PIK3C3-Aktivität auf BECN1-abhängige Weise.
• ATG14 ist essenziell für die autophagieabhängige Phosphorylierung von BECN1, stimuliert die BECN1-Phosphorylierung und unterdrückt gleichzeitig die AMPK-vermittelte Phosphorylierung von PIK3C3. Verwandte Referenzen: PMID:23878393
• Es bindet an den STX17-SNAP29-t-SNARE-Komplex auf Autophagosomen und bereitet ihn für die Interaktion mit VAMP8 vor, wodurch die Fusion von Autophagosom und Endolysosom gefördert wird. Verwandte Referenzen: PMID:25686604, PMID:37632749
• ATG14 lokalisiert sich im Zytoplasma, an der Membran des Endoplasmatischen Retikulums, an der Membran präautophagösomer Strukturen und an der Autophagosomenmembran – was seine Rolle bei der Biogenese und Reifung von Autophagosomen widerspiegelt.
• ATG14 ist ein Coiled-Coil-Protein, das alternativ gespleißt wird; es ist phosphoryliert und ubiquitiniert, wie durch Proteomikstudien belegt wird.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen deckt den C-terminalen Bereich (AA 340–440) von humanem ATG14 ab, der artspezifisch konserviert ist und die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte unterstützt. Validieren Sie das Antikörper in Ihrem relevanten Probenystem.
• Bei der Western Blotting ist eine Bande bei ca. 55 kDa zu erwarten; für Autophagie-Induktionsexperimente empfehlen wir die Verwendung von Ganzzelllysaten oder subzellulären Fraktionen.
• Bei IF/ICC-Protokollen sollte eine Permeabilisierung durchgeführt werden, um membranlokalisiertes ATG14 auf Autophagosomen und anderen Kompartimenten nachzuweisen; geeignete Negativ- und Positivkontrollen werden empfohlen.
• Bei ELISA-Anwendungen kann eine Optimierung der Konzentration des beschichteten Antigens und der Antikörperverdünnung erforderlich sein; fügen Sie eine Standardkurve für die quantitative Bestimmung hinzu.

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