Anti-ATG12 Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IP, ELISA – O94817

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ATG12

• ATG12 (Autophagie-assoziiertes Protein 12) ist ein Ubiquitin-ähnliches Protein aus der Familie der Autophagie-assoziierten (ATG) Proteine, das für die Bildung von Autophagosomen unerlässlich ist.
• Es wird über ein Ubiquitin-ähnliches Konjugationssystem mit ATG7 (E1-ähnlich) und ATG10 (E2-ähnlich) an ATG5 gebunden, wodurch ein ATG12-ATG5-Konjugat entsteht. Dieses wirkt als E3-ähnliches Enzym für die Lipidierung der ATG8-Familie, ein kritischer Schritt bei der Expansion der Autophagosomenmembran.
• Das ATG12-ATG5-Konjugat ist im Komplex mit ATG16L1 erforderlich für die Rekrutierung von LRRK2 an gestresste Lysosomen und die Induktion der LRRK2-Kinaseaktivität unter Bedingungen von lysosomalem Stress.
• ATG12 ist im Zytoplasma und an der Membran der präautosomalen Struktur lokalisiert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Azetylierung und die Bildung einer Isopeptidbindung während der Konjugation; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.
• ATG12 spielt eine Rolle bei Wirt-Virus-Interaktionen: Es wirkt als proviraler Faktor für das Hepatitis-C-Virus (HCV), indem es die Translation eintretender viraler RNA unterstützt, und es reguliert die angeborene antivirale Immunantwort gegen das vesikuläre Stomatitis-Virus (VSV) negativ, indem es die Produktion von Typ-I-Interferon beeinträchtigt. Verwandte Referenzen: PMID:17709747, PMID:19666601
• Die Gewebeexpression ist ubiquität.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (Aa 1-100) von menschlichem ATG12, sodass es sowohl nicht konjugiertes ATG12 (15 kDa) als auch das ATG12-ATG5-Konjugat (~55 kDa) erkennen kann. Für den Western Blot sollten reduzierende Bedingungen verwendet werden, um zwischen diesen Formen zu unterscheiden.
• Für IHC-P kann eine Antigen-Retrieval erforderlich sein; validieren Sie den Antikörper in Geweben, die bekanntermaßen ATG12 exprimieren (Expression ist ubiquität, aber Bedingungen mit Hochregulation der Autophagie können die Färbung verstärken).
• Für IP ist der Antikörper geeignet, um native ATG12-Komplexe zu erfassen; stellen Sie sicher, dass die Lysebedingungen korrekt sind, um Proteininteraktionen zu erhalten.
• Für ELISA-Anwendungen kann dieser Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; testen Sie bei Bedarf die Kreuzreaktivität mit murinem ATG12.

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