Anti-ATG12 Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, ELISA – O94817

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ATG12

• ATG12 ist ein ubiquitin-ähnliches Protein, das für die Bildung von Autophagievakuolen essenziell ist. Es konjugiert über ein ubiquitin-ähnliches System mit ATG7 (E1-ähnlich) und ATG10 (E2-ähnlich) mit ATG5, und das ATG12-ATG5-Konjugat wirkt als E3-ähnliches Enzym für die ATG8-Lipidierung und Membranassoziation (Ähnlichkeit gemäß).
• Der ATG12-ATG5-ATG16L1-Komplex rekrutiert LRRK2 zu gestressten Lysosomen und induziert die LRRK2-Kinaseaktivität bei lysosomalem Stress (Ähnlichkeit gemäß).
• ATG12 kann als proviraler Faktor wirken: In Verbindung mit ATG5 reguliert es die angeborene antivirale Immunität negativ, indem es die Produktion von Typ-I-IFN nach einer VSV-Infektion hemmt. Zugehörige Referenzen: PMID:17709747
• Es wird für die Translation der eintreffenden RNA des Hepatitis-C-Virus (HCV) benötigt, um die Replikation zu initiieren, nicht aber für die Aufrechterhaltung nach Etablierung der Infektion. Zugehörige Referenzen: PMID:19666601
• ATG12 lokalisiert zum Zytoplasma und zu den Membranen präautophagosomaler Strukturen, was mit seiner Rolle bei der Autophagosomenbildung übereinstimmt.
• Das Protein wird in allen menschlichen Geweben ubiquitär exprimiert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Isopeptidbindungsbildung als Teil des Ubl-Konjugationswegs.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 41–140 von menschlichem ATG12 entspricht. Es kann sowohl freies ATG12 als auch das ATG12-ATG5-Konjugat erkennen. Berücksichtigen Sie dies bei der Interpretation von Ergebnissen in Autophagie-assoziierten Assays.
• Für Western Blot validieren Sie die Detektion um 15 kDa (oder 55–60 kDa für das Konjugat) in humanen und murinen Zelllysaten. Verwenden Sie geeignete Kontrollen für die Autophagieinduktion (z. B. Hunger oder lysosomaler Stress).
• Für ELISA kann die Beschichtung mit dem Immunogenpeptid oder rekombinantem ATG12-Protein die Assayleistung verbessern. Prüfen Sie die Kreuzreaktivität mit ATG5 und anderen ubiquitin-ähnlichen Proteinen, wenn Spezifität entscheidend ist.

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