Anti-ATG12 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - O94817

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von ATG12

• Das ubiquitinähnliche Protein ATG12 (auch als APG12-ähnliches Protein bekannt) ist eine Schlüsselkomponente des Autophagie-Wegs und für die Bildung von Autophagosomen unerlässlich.
• ATG12 konjugiert über ein ubiquitinähnliches System, an dem ATG7 (E1-ähnlich) und ATG10 (E2-ähnlich) beteiligt sind, mit ATG5. Das ATG12-ATG5-Konjugat wirkt anschließend als E3-ähnliches Enzym und fördert die Lipidierung von Proteinen der ATG8-Familie sowie deren Membranassoziation.
• Der ATG12-ATG5-Komplex ist zusammen mit ATG16L1 für die Rekrutierung von LRRK2 zu gestressten Lysosomen und die Induktion der LRRK2-Kinaseaktivität als Reaktion auf lysosomalen Stress erforderlich (aufgrund von Ähnlichkeiten).
• Auf subzellulärer Ebene befindet sich ATG12 im Zytoplasma und an der Membran der präautophagosomalen Struktur, was mit seiner Rolle in frühen Schritten der Autophagie übereinstimmt.
• ATG12 wird in menschlichen Geweben ubiquitär exprimiert, was seine grundlegende Rolle bei der zellulären Homöostase widerspiegelt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören die Acetylierung und die Bildung einer Isopeptidbindung mit ATG5. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen, und eine 3D-Struktur wurde aufgeklärt (Proteomik-Identifizierung; Referenzproteom; Ubl-Konjugationsweg).
• Bei viralen Infektionen wirkt ATG12 als proviraler Faktor: Das ATG5-ATG12-Konjugat reguliert die angeborene antivirale Immunantwort negativ, indem es die Produktion von Typ-I-IFN bei einer VSV-Infektion beeinträchtigt; außerdem ist es für die Translation der eingehenden HCV-RNA und die Initiierung der Replikation erforderlich, jedoch nicht für eine etablierte Infektion. Verwandte Referenzen: PMID:17709747 PMID:19666601

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der N-terminalen Region (AS 1–100) des humanen ATG12. Es sollte überprüft werden, ob das Epitop in Ihrem Probentyp zugänglich ist; für WB ist möglicherweise keine standardmäßige Antigenrückgewinnung erforderlich.
• Beim Western Blot ist für monomeres ATG12 eine Bande bei etwa 15 kDa zu erwarten. Das ATG12-ATG5-Konjugat kann unter nicht reduzierenden Bedingungen bei einem höheren Molekulargewicht erscheinen; geeignete Kontrollen sollten eingeschlossen werden, um die verschiedenen Formen zu unterscheiden.
• Bei Immunfluoreszenz/ICC ist ein zytoplasmatisches und punktförmiges Färbemuster zu erwarten (präautophagosomale Strukturen). Eine Kofärbung mit Autophagie-Markern (z. B. LC3) kann helfen, die Spezifität zu bestätigen.
• Dieser polyklonale Antikörper ist kreuzreaktiv mit ATG12 von Maus und Ratte und eignet sich daher für Spezies-übergreifende Studien. Die Validierung sollte stets im relevanten Spezieshintergrund erfolgen.
• Wie bei allen polyklonalen Antikörpern ist eine Chargen-zu-Chargen-Variabilität möglich. In jedem Experiment sollten positive und negative Kontrollen eingeschlossen werden; außerdem sollte eine Titration zur Optimierung des Signal-Rausch-Verhältnisses in Betracht gezogen werden.

CamelBio: Ihre zentrale Beschaffungsplattform

CamelBio ermöglicht diagnostischen Herstellern, Laboren und Forschungseinrichtungen einen optimierten Zugang zu IVD-Rohstoffen, darunter validierte Antikörper für die Erforschung von Autophagie und Wirt-Pathogen-Interaktionen. Neben diesem polyklonalen ATG12-Antikörper liefern wir optimierte monoklonale und polyklonale Antikörper, Antikörperpaare sowie Hilfsreagenzien in großen Mengen und unterstützen bei der Beschaffung von Rohstoffen gegen seltene Zielstrukturen. Damit begleiten wir Ihren Workflow vom Konzept bis zur klinischen Anwendung.