Kaninchen-monoklonaler Anti-ATF3-Antikörper für WB - P18847

Wesentliche Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von ATF3

• ATF3 (Activating Transcription Factor 3) ist ein basischer Leucin-Zipper-Transkriptionsfaktor (bZIP), der vom ATF3-Gen kodiert wird. Er bindet an die Konsensussequenz des cAMP-Response-Elements (CRE) 5'-GTGACGT[AC][AG]-3', die in vielen viralen und zellulären Promotoren vorkommt.
• Er fungiert als dualer Regulator: Er reprimiert die Transkription von ATF-Stellen, indem er inhibitorische Kofaktoren am Promotor stabilisiert, und aktiviert die Transkription, indem er diese Kofaktoren von den Promotoren fernhält.
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen. Isoform 1 wirkt als transkriptioneller Repressor, während eine stressinduzierte Isoform dieser Repression entgegenwirkt, was die dynamische Rolle bei der Stressantwort hervorhebt.
• ATF3 ist im Zellkern lokalisiert, wo es als Reaktion auf verschiedene Stimuli wie Zytokine, Wachstumsfaktoren und DNA-Schäden transkriptionelle Programme koordiniert.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Phosphorylierung und Ubiquitinierung (Isopeptidbindung), die seine Stabilität, Aktivität und Proteininteraktionen modulieren.
• Als wichtiges stressinduzierbares Gen ist ATF3 an Prozessen wie Apoptose, Zellzyklusregulation und Immunantworten beteiligt und steht damit im Zusammenhang mit Krebs, Neurodegeneration und Stoffwechselerkrankungen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die N-terminale Region (Aminosäuren 1–77), wodurch möglicherweise mehrere Isoformen erkannt werden. Validieren Sie die Spezifität in geeigneten humanen oder murinen Zelllinien und berücksichtigen Sie das variable Molekulargewicht (12–21 kDa), das im Western Blot aufgrund von Isoformunterschieden und Modifikationen häufig beobachtet wird.
• Optimieren Sie für den Western Blot die reduzierenden Bedingungen und den Acrylamidanteil, um kleine Proteinbanden aufzulösen; für eine bessere Trennung können 15-%-Gele oder Gradientengele verwendet werden.
• Bei ChIP-Experimenten sollten die Crosslinking-Bedingungen sorgfältig titriert werden, da ATF3 nur vorübergehend an Promotoren gebunden ist; der Antikörper kann für eine Anreicherung mit anschließender qPCR oder Sequenzierung geeignet sein.
• Bei IP können Standardprotokolle mit Waschschritten geringer Stringenz die Erhaltung von ATF3-interagierenden Komplexen ermöglichen.
• Die ELISA-Leistung kann durch Beschichtung mit rekombinantem ATF3-Protein oder Lysaten bewertet werden; der Antikörper kann möglicherweise als Fänger- oder Detektionsreagenz in einem Sandwich-Immunoassay eingesetzt werden.

CamelBio: Ihre zentrale Beschaffungsbrücke

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