Anti-ASL-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P04424

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ASL-Funktion und -Lokalisierung

• ASL kodiert Argininosuccinat-Lyase, ein homotetrameres Enzym des Harnstoffzyklus, das die reversible Spaltung von L-Argininosuccinat in Fumarat und L-Arginin katalysiert, ein kritischer Schritt für die hepatische Stickstoffentgiftung und die de-novo-Arginin-Synthese in nicht-hepatischen Geweben. Verwandte Referenzen: PMID:1174743232 PMID:11747433 PMID:22081021
• ASL ist ein wesentlicher Regulator der intrazellulären und extrazellulären L-Arginin-Pools.
• Im Citrullin-Stickstoffmonoxid-Zyklus bildet ASL gewebespezifische Multiprotein-Komplexe mit Argininosuccinat-Synthase (ASS1), dem kationischen Aminosäure-Transporter SLC7A1 und Stickstoffmonoxid-Synthase-Isoformen (NOS1, NOS2 oder NOS3), um die zellautonome L-Arginin-Synthese zu ermöglichen und extrazelluläres L-Arginin in die Stickstoffmonoxid-Produktion zu leiten. Verwandte Referenzen: PMID:22081021
• Alternatives Spleißen erzeugt mehrere ASL-Transkriptvarianten, und das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen wie Acetylierung.
• Das Protein hat ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ca. 52 kDa (UniProt: 51658 Da).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Für Western Blot (WB) liegt die erwartete Bande für endogenes ASL bei ca. 52 kDa; erwägen Sie die Optimierung der Verdünnung des Primärantikörpers und die Verwendung geeigneter Ladungskontrollen.
• Für die Immunhistochemie an Paraffin-eingebetteten Geweben (IHC-P) wird eine hitzeinduzierte Antigen-Retrieval mit Citratpuffer (pH 6,0) empfohlen, um Epitope freizulegen.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie (IF/ICC) fixieren Sie die Zellen mit 4% Paraformaldehyd und permeabilisieren Sie sie vor der Färbung mit 0,1% Triton X-100; eine Gegenfärbung mit Kernfarbstoffen kann helfen, das zytosolische Enzym zu lokalisieren.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann er mehrere Epitope und potenzielle Isoformen erkennen; validieren Sie die Spezifität im entsprechenden Spezies- und Gewebesystem.
• Für ELISA kann der Antikörper zum Antigen-Capture oder -Nachweis verwendet werden; geeignete Beschichtungs- und Blockierungsbedingungen sollten empirisch ermittelt werden.

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