Anti-ARMET/ARP/MANF Kaninchen-poliklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, IP, ELISA - P55145

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von MANF (ARMET/ARP)

• Der aus mesenzephalen Astrozyten stammende neurotrophe Faktor (MANF), auch bekannt als Arginin-reiches Protein (ARMET/ARP), ist ein sezernierter neurotropher Faktor, der das Überleben dopaminerger Neuronen fördert und die GABAerge Übertragung in der Substantia nigra moduliert. Verwandte Referenzen: PMID:12794311
• MANF hemmt die Zellproliferation und den durch endoplasmatischen Retikulum (ER)-Stress induzierten Zelltod. Es wird unter normalen Bedingungen durch Assoziation mit dem Chaperon HSPA5/BiP im ER/sarkoplasmatischen Retikulum zurückgehalten und bei ER-Stress sezerniert. Verwandte Referenzen: PMID:18561914, PMID:22637475, PMID:29497057
• Sezerniertes MANF bindet an 3-O-Sulfogalactosylceramid (Sulfatid) auf Zielzellmembranen und fördert die zelluläre Aufnahme durch Endozytose, was für seine Rolle bei der Linderung von ER-Stress und Zelltoxizität unter hypoxischen Bedingungen erforderlich ist. Verwandte Referenzen: PMID:29497057
• MANF ist essenziell für die embryonale Lungenentwicklung, die postnatale Architektur der weißen Milzpulpa, die endochondrale Ossifikation und die Skelettmuskelreparatur, bei der es den Übergang von Makrophagen-Phänotypen reguliert, um Entzündungen zu begrenzen.
• Subzellulär lokalisiert MANF unter normalen Bedingungen im Lumen des endoplasmatischen Retikulums und des sarkoplasmatischen Retikulums und wird als Reaktion auf Stress sezerniert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung, Phosphorylierung und Sialinsäureaddition. MANF fungiert in der Antwort auf ungefaltete Proteine (UPR) und in Stressantwortwegen.
• Mutationen in MANF sind mit Taubheit, Diabetes mellitus und Zwergwuchs assoziiert, was seine vielfältigen physiologischen Funktionen unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Immunogen-Design: Der Antikörper wurde gegen ein rekombinantes Fusionsprotein erhoben, das die Aminosäuren 25-182 von menschlichem MANF umfasst und das reife Polypeptid abdeckt. Diese Region ist bei Mensch, Maus und Ratte gut konserviert, was die Kreuzreaktivität unterstützt.
• Western Blot (WB): Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt 21 kDa; beachten Sie jedoch, dass posttranslationale Modifikationen (z. B. Glykosylierung) leichte Bandenverschiebungen verursachen können. Validieren Sie mit geeigneten Positivkontrollen und erwägen Sie Modelle zur ER-Stress-Induktion, um die regulierte Sekretion zu beurteilen.
• Immunhistochemie (IHC-P) und Immunzytochemie (IF/ICC): Aufgrund der Sekretion und ER-Lokalisation von MANF sorgen Sie für ausreichende Permeabilisierung und schließen Sie ER-Marker für Ko-Lokalisationsstudien ein. Optimieren Sie die Antigen-Retrieval für paraffineingebettete Schnitte.
• Immunpräzipitation (IP) und ELISA: Die poliklonale Natur bietet eine robuste Capture- und Detektionskapazität. Für Sandwich-ELISA erwägen Sie die Paarung mit einem monoklonalen Antikörper, der ein anderes Epitop erkennt.
• Allgemeiner Hinweis: Als poliklonaler Antikörper sollte die Chargenkonsistenz in Ihrem spezifischen Assaysystem überprüft werden. Fügen Sie immer geeignete Isotyp- und Negativkontrollen hinzu.

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