Anti-ARF6 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P62330

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ARF6-Funktion und -Lokalisierung

• ARF6 (ADP-Ribosylierungsfaktor 6) ist eine kleine GTPase der ARF-Familie, die durch das ARF6-Gen kodiert wird und zwischen einem GDP-gebundenen inaktiven und einem GTP-gebundenen aktiven Zustand zyklisch wechselt, um mehrere Aspekte des intrazellulären Membranverkehrs zu regulieren.
• Als zentraler Akteur beim endozytischen Recycling steuert ARF6 die Rückkehr internalisierter Fracht von Recycling-Endosomen zur Plasmamembran, erleichtert die Umbildung des Zytoskeletts und die Zellmigration (PubMed:11266366, PubMed:16737952, PubMed:18400762).
  Verwandte Referenzen: PMID:11266366 PMID:16737952 PMID:18400762
• In seiner GTP-gebundenen Form vermittelt ARF6 den Transport von palmitoylierten Proteinen vom trans-Golgi-Netzwerk zur Plasmamembran, eine Funktion, die für die polarisierte Sekretion und die Bereitstellung von Oberflächenrezeptoren kritisch ist (PubMed:37461827).
  Verwandte Referenzen: PMID:37461827
• ARF6 ist für die mitotische Zytokinese essentiell, lokalisiert an der Furche und dem Mittelkörper, um eine ordnungsgemäße Trennung der Tochterzellen zu gewährleisten.
• Das Protein moduliert aktiv die neuronale Morphologie durch Regulation der Entwicklung von Dendritendornen, Verzweigungen und Filopodienverlängerungen und verstärkt das Neuritenwachstum durch Interaktion mit dem Adapterprotein APBB1 (PubMed:14978216, PubMed:36250347).
  Verwandte Referenzen: PMID:14978216 PMID:36250347
• Während der epithelialen Polarisation steuert ARF6 die Umbildung von Verbindungen durch Kontrolle der Oberflächenpegel von Adherens-Junktions-Proteinen wie CDH1 und spielt eine Rolle beim Recycling von NTRK1 aus frühen Endosomen (PubMed:36017701).
  Verwandte Referenzen: PMID:36017701
• ARF6 ist auch an der mikrobiellen Pathogenese beteiligt: Es aktiviert allosterisch Cholera-Toxin und erleichtert den Eintritt von Enterovirus 71 in Gehirn-Endothelzellen.
• ARF6 ist ubiquitär exprimiert mit höheren Spiegeln im Herzen, der Substantia nigra und der Niere; es lokalisiert in mehreren Membrankompartimenten einschließlich der Plasmamembran, Endosomen und des Golgi-Apparats und wird posttranslational durch Myristoylierung modifiziert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 1–175 von menschlichem ARF6 und umfasst die N-terminale GTP-Bindungsdomäne; der resultierende polyklonale Antikörper kann sowohl GDP- als auch GTP-beladene Konformationen nachweisen.
• Die Western-Blot-Analyse wird voraussichtlich ein Band bei etwa 20 kDa zeigen; verwenden Sie Lysate aus menschlichen, murinen oder rattigen Zelllinien oder Geweben als positive Kontrollen.
• Für die Immunfluoreszenz/ICC wird eine ARF6-Färbung an der Plasmamembran, den Recycling-Endosomen und intrazellulären Vesikeln erwartet; Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen sollten für membranassoziierte Ziele optimiert werden.
• ELISA-Anwendungen können unter Verwendung von rekombinantem ARF6-Protein oder Peptidfragmenten entwickelt werden; erwägen Sie die Einbeziehung negativer Kontrollen, um die Hintergrundbindung zu bewerten.

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