Anti-APRT Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P07741

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von APRT

• APRT kodiert für Adeninphosphoribosyltransferase, ein Enzym des Purin-Salvagewegs. Die kanonische Isoform hat ein Gewicht von ca. 19,6 kDa, alternatives Spleißen erzeugt zusätzliche Varianten.
• Das Enzym katalysiert die Umwandlung von Adenin und 5-Phosphoribosyl-1-pyrophosphat (PRPP) zu AMP und Pyrophosphat – eine Reaktion, die energetisch günstiger ist als die de-novo-Synthese von AMP.
• APRT gehört zur Familie der Purin/Pyrimidin-Phosphoribosyltransferasen und ist entscheidend für das Recycling von Adenin aus Nahrungsaufnahme und Nukleinsäureumsatz.
• Die subzelluläre Lokalisation ist hauptsächlich zytoplasmatisch, was mit seiner Rolle im zytoplasmatischen Nukleotid-Salvageweg übereinstimmt.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die Enzymaktivität oder Stabilität modulieren können.
• Genetische Variationen in APRT sind mit einem Adeninphosphoribosyltransferase-Mangel verbunden, einer Erkrankung, die zu 2,8-Dihydroxyadenin-Urolithiasis und Nierenversagen führt.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das verwendete Immunogen entspricht der N-terminalen Region (AS 1–180) von humanem APRT, die eine hohe Homologie zu Maus-APRT aufweist – dies erklärt die beobachtete Kreuzreaktivität.
• Dieser polyklonale Antikörper kann aufgrund von alternatives Spleißen mehrere APRT-Isoformen nachweisen; überprüfen Sie das erwartete Molekulargewicht (~20 kDa) in Ihrem Probenystem.
• Fügen Sie für Western Blot geeignete Negativ- und Positivkontrollen hinzu (z. B. APRT-überexprimierte Lysate oder Gewebe mit bekannter Expressionshöhe).
• Stellen Sie für ELISA eine Beschichtungskompatibilität sicher und erwägen Sie die Kombination mit einem Sekundärdetektionssystem, das für polyklonale Kaninchenantikörper optimiert ist.
• Aufgrund der zytoplasmatischen Lokalisation werden milde Lysepuffer für eine effiziente Proteinextraktion empfohlen.

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