Anti-APRT Kaninchen monoklonaler Antikörper (KD validiert) für WB, IF/ICC, ELISA - P07741

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: APRT-Funktion und -Lokalisierung

• Die Adenin-Phosphoribosyltransferase (APRT) katalysiert die Salvage-Synthese von AMP aus Adenin und 5-Phosphoribosyl-1-pyrophosphat (PRPP), eine Reaktion, die energetisch weniger aufwendig ist als die de-novo-Purin-Biosynthese.
• Dieses Enzym bietet einen alternativen Weg zur Aufrechterhaltung der Adenylnukleotid-Pools, was besonders in Geweben mit hohem Energiebedarf oder begrenzter de-novo-Synthesekapazität wichtig ist.
• APRT gehört zur Familie der Purin/Pyrimidin-Phosphoribosyltransferasen und ist evolutionär über die Arten hinweg konserviert.
• Das Protein lokalisiert sich vorwiegend im Zytoplasma, was seiner Rolle im zytoplasmatischen Nukleotidstoffwechsel entspricht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, die die Enzymaktivität oder -stabilität regulieren können; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Transkriptvarianten.
• Mutationen im APRT-Gen sind mit einem Adenin-Phosphoribosyltransferase-Mangel verbunden, einer Störung, die zu 2,8-Dihydroxyadenin-Urolithiasis und chronischer Nierenerkrankung führt (Schlüsselwort für Krankheitsvariante).
• Das Molekulargewicht der kanonischen Isoform beträgt ca. 19,6 kDa, was der beobachteten 20 kDa-Bande beim Western Blot entspricht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst das全长 humane APRT (Reste 1–180), was eine Erkennung von nativen und denaturierten Formen nahelegt; validieren Sie dies in relevanten Probensystemen.
• Für den Western Blot ist eine Bande um 20 kDa zu erwarten; verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker und berücksichtigen Sie Ladekontrollen für die quantitative Analyse.
• Bei der Immunfluoreszenz/Immunzytochemie sollte eine zytoplasmatische Färbung beobachtet werden; Kontrollen wie APRT-Knockout-Zelllinien können helfen, die Spezifität zu bestätigen.
• Die ELISA-Leistung kann von den Beschichtungsbedingungen und der Antikörperverdünnung abhängen; eine Optimierung wird empfohlen.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-APRT wurde bestätigt, aber die Sequenzhomologie deutet auf eine mögliche Erkennung anderer Säugetierarten hin; überprüfen Sie dies bei der Verwendung über Mensch, Maus oder Ratte hinaus.

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